TBA溶液说明书
货号: B03310
规格:100ml
保存:4℃,避光,6个月
产品简介:
动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时，会发生脂质氧化，丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物，一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA在内的复杂化合物，此时通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标，生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA，例如thromboxane synthase也可以催化产生，但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。
TBA溶液又称硫代巴比妥酸溶液，由硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)、稀酸和水等组成。TBA溶液可用于脂质氧化(MDA)的检测，是采用一种基于MDA和TBA反应产生红色产物的显色反应，再通过比色法用于对血浆、血清、尿液、动植物组织或细胞裂解液中MDA进行定量检测。丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA发生反应形成红色的MDA-TBA加合物，MDA-TBA加合物在535nm处有最大吸收，可通过比色法进行检测。另外MDA-TBA加合物也可以在535nm被激发产生最大发射波长553nm，也可进行荧光检测。该产品仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
自备材料：
1、生理盐水或 PBS、脂质氧化(MDA)检测相关试剂
2、离心管、96 孔板、酶标仪或分光光度计、水浴锅或恒温箱、离心机
操作步骤(仅供参考):
1、准备样品:
①血清、血浆、尿液、脑脊液样品:从待测样本中分离出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水或 PBS 稀释后检测。
②组织、细胞等样品:组织或细胞可以使用 PBS 或 RAPI 裂解液等进行匀浆或裂解，匀浆或裂解组织时组织重量占匀浆液或裂解液的比例应为10%;对于细胞，每 106个细胞使用 0.1mL裂解液或匀浆液，匀浆或裂解后1600g 离心10min，取上清用于后续测定匀浆或裂解等样品制备步骤宜在冰浴或 4℃进行操作，样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内 MDA 含量。
注意事项：
1、TBA 溶液避免反复冻融或长期打开瓶盖，以免失效或效率下降。
2、参考取样量:血清、血浆、尿液取 100 μL;低密度脂蛋白悬液取 100~200 μL;食用油取 30 μl;肝脏、心肌、肌肉等，取 5% 或 10% 匀浆 100~20 μL。
3、测定样品吸光度值较低时，可将水浴延长至 80min，但应同时延长，以免造成批间差异。
4、待测样本如不能及时测定，应置于-20℃保存，4天内稳定。
5、避免使用 EDTA、枸橼酸、氟化钠、草酸等抗凝剂。