细胞污染高效清除剂说明书
货号: C00600
规格:500μL/1mL
英文名称:Contaminant Efficient Removal Agent
保存:-20℃避光保存,有效期1年。
产品说明(仅供参考):
该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
细胞污染高效清除剂旨在全面保护细胞免受微生物污染,不仅可以显著清除支原体污染,还可有效消除真菌和细菌的污染,在整个培养过程中均可使用,可加入培养基或用于组织清洗,只需1-3天就可显著抑制真菌、细菌、支原体的增殖,1-2周左右即可清除污染,本产品经过了上百种细胞的测试和长期的实验验证,完美兼具高效和广谱清除细胞污染物的能力,对细胞生长几乎无影响,最大程度上挽救您的细胞。
产品特点
高效性,1天即可有效抑制真菌、细菌、支原体的增殖;
高特异性,特异性清除细胞培养过程中的污染物;
无耐药性,活性成分为多肽类,不会产生耐药性;
高利用率,未被利用的成分可降解为氨基酸被细胞利用;
高安全性,对细胞几乎无毒性,已在上百种细胞上验证。
使用说明(仅供参考)
从-20℃冰箱内取出细胞污染高效清除剂,将试剂管瞬时离心(3000 rpm,3~5 s)后放置于EP管架上,用75%的酒精喷洒试剂管的表面,在生物安全柜中进行无菌操作;
清洗组织操作规程
对于易污染的消化系统、生殖系统、泌尿系统、皮肤系统的组织进行原代细胞培养,组织的无菌是细胞培养的先决条件。
分离目的组织后,用PBS将血液、毛发、污垢清洗干净。配制适量含有2000×细胞污染高效清除剂的PBS,如:10 mL的PBS加入5μL的细胞污染高效清除剂混匀。用含药PBS浸泡组织2~5 min,浸泡清洗3次,即可有效预防细菌、真菌、支原体污染。
清除细胞污染操作规程
- 以T25细胞培养瓶为例
对于已检测污染或怀疑有污染的细胞,在细胞培养基中加入适量细胞污染高效清除剂,通常推荐使用的稀释倍数为2000×,如:6 mL的细胞培养基加入3μL的细胞污染高效清除剂混匀。连续加药培养1-2周即可有效清除细胞污染。
若细胞污染较严重,可酌情增加药物浓度以提高清除细胞污染的效率,推荐尝试最小稀释倍数、中间稀释倍数、最大稀释倍数三个浓度进行测试。以细胞系(成纤维样)为例,建议将细胞分为三份,分别采用500×、1000×、2000×三个浓度进行细胞污染清除。若500×对细胞生长无明显影响,建议采用500×清除细胞污染,若500×对细胞生长有明显影响,则采用1000×清除污染,连续加药培养2周后,检测是否还存在细胞污染。如果还存在细胞污染,可继续培养1周。
注意:可参考下表选择稀释倍数,达到最佳清除效果。
细胞类型 | 细胞对药敏感度 | 细胞举例 | 建议稀释倍数 |
细胞系(成纤维样) | + | 293T、Raw264.7、HT22、3T3-L1、HSF、C2C12、L929 | 500×~2000× |
细胞系(上皮样) 原代细胞(成纤维样) | ++ | MCF-7、Hep G2、Hela、HUVEC、皮肤成纤维细胞、间质细胞 | 1000×~2000× |
原代细胞(上皮样) | +++ | 肝内胆管上皮细胞、脐静脉内皮细胞、肿瘤细胞 | 1500×~2000× |
干细胞 | +++++ | H1、H9、iPS、MSC | 4000×~5000× |
预防细胞污染操作规程
- 以T25细胞培养瓶为例
若细胞需连续培养,建议每2~3周进行定期预防。在细胞培养基中加入适量细胞污染高效清除剂,通常推荐使用的稀释倍数为2500×,如:6 mL的细胞培养基加入2.4μL的细胞污染高效清除剂混匀。连续加药培养1-2周,可有效防止细胞污染或抑制细胞污染物增殖。
注意:可参考下表选择稀释倍数,有效预防细胞污染。
细胞类型 | 细胞对药敏感度 | 细胞举例 | 建议稀释倍数 |
细胞系(成纤维样) | + | 293T、Raw264.7、HT22、3T3-L1、HSF、C2C12、L929 | 2500× |
细胞系(上皮样) 原代细胞(成纤维样) | ++ | MCF-7、Hep G2、Hela、HUVEC、皮肤成纤维细胞、间质细胞 | 2500× |
原代细胞(上皮样) | +++ | 肝内胆管上皮细胞、 脐静脉内皮细胞、肿瘤细胞 | 2500× |
干细胞 | +++++ | H1、H9、iPS、MSC | 6000× |
实验流程图
注意事项:
- 本产品经0.1μm过滤除菌,使用本产品时无需过滤,可直接加入培养基使用;
- 本试剂具有专利技术,-20℃保存时不冻结,使用时无需解冻,直接从-20℃取出即可使用,不会出现反复冻融析出现象;
- 为了发挥最好的药效,含药培养基建议现配现用,如果加药培养基未用完,于4℃冰箱中避光保存,2周内用完,使用培养基前需预热至37℃;
- 大部分的污染物存在于细胞表面和细胞间隙。细胞换液或传代前,用无菌PBS轻轻冲洗细胞表面2-3次,可将部分污染物去除;
- 大部分污染物直径小于细胞直径。传代后,500rpm低速离心,容易将细胞和污染物分离,弃上清即可祛除部分污染物,铺细胞需更换为新的瓶/板;
- 若贴壁细胞污染严重,采用高浓度药物(500×~1000×)清除污染时,传代后,为了防止药物影响细胞贴壁,建议待大部分细胞贴壁后再加入药物,即先用完全培养基重悬细胞,铺瓶,0.5~2 h后在培养基中加入对应稀释倍数的细胞污染高效清除剂,轻轻混匀,放入培养箱继续培养;
- 如遇个别细胞对本试剂敏感,细胞生长速度明显受影响时,建议减量使用或进行稀释度测试;
- 细胞污染高效清除剂处理后,会有很好的预防和清除效果,但是如果环境或使用试剂中仍有污染源存在,细胞可能会再次污染,因此需做好适当的预防措施;
- 加入本产品进行污染物预防和清除时,无需添加双抗(青霉素-链霉素);
- 产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。