红细胞裂解液 (无菌 )

红细胞裂解液使用说明书

货号：C01500 规格：100ml /500ml

保存：2-8℃保存，保质期2年。常温运输。

产品简介：

本产品是利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀破的原理来裂解无核红细胞的。不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。 本产品经无菌处理，主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。

使用说明：

血液样品处理：

1. 取新鲜抗凝血，400-500g离心5分钟，离心弃上清。
2. 加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入6-10ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠的血液，裂解1-2分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至4-5分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。
3. 400-500g离心5分钟，弃红色上清。4ºC离心效果更佳。
4. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5. 洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。可再重复1次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4ºC离心效果更佳。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。如提取RNA，最好于此步开始使用DEPC水配制的溶液进行操作。

注意：对于微量或少量的血液样品，可以在第一步中不进行离心弃上清的操作，直接在第二步中加入10倍血液体积的红细胞裂解液，并在室温或4ºC裂解4-5分钟。对于鼠的血液，裂解4-5分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至10分钟，但通常不宜超过15分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。

组织细胞处理：

新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液，离心弃去上清液。加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。其余同上。

注意事项：

本裂解液为无菌产品，分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作。

为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。