产品详情
DAPI溶液(5μg/ml)说明书
货号:C02070
规格:10mL/50mL
保存:-20℃避光保存,2年有效。
产品说明:
DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与DNA中大部分A,T碱基相互结合的荧光染料,常用于荧光显微镜检测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。
DAPI染色液(5μg/ml)可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,亦可以根据实验具体要求,稀释到相应浓度后进行染色。一般推荐工作浓度为0.5~10μg/ml。
使用方法:(仅供参考)
1、对于细胞或组织样品,固定后冲洗去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色,如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液(5μg/ml),覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品3倍体积以上的DAPI染色液(5μg/ml),充分混匀。
2、室温放置5~8min。
3、轻轻吸除DAPI染色液(5μg/ml)。
4、用无菌的PBS或生理盐水清洗2~3次,每次3~5min。
5、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。
染色结果:
细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
注意事项:
- DAPI染色液(5μg/ml)的浓度适用于绝大多数常规染色的需要。
- 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。
- 为减缓荧光淬灭,可以使用抗荧光淬灭封片液。
- 避免反复冻融,否则容易失效。
- DAPI对人体有刺激性,请注意适当防护。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。