基底胶 (含酚红 )

Matrigel 基底胶使用说明

货号：C02990/C02980

规格：1mL

保存：-20℃保存，避免反复冻融，用量少时可小量无菌分装。

产品说明：

Matrigel是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中分离出的基底膜基质，其主要成分由层粘连蛋白，Ⅳ型胶原，巢蛋白，硫酸肝素糖蛋白等组成，还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。Matrigel基底胶在室温条件下，聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，以及对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达的研究。

细胞可在0.5mm厚度的Matrigel基质层表面生长，也可在1mm厚度的Matrigel三维基质内生长。过度稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层，可以用于细胞贴壁，但不能用于细胞的分化研究。

本产品由DMEM培养基配制，含有50ug/ml庆大霉素，具体浓度请参考产品标签。

注意事项：

1. 因Matrigel在10℃以上即可成胶，在操作过程中，保持Matrigel一直置于冰上，所有接触Matrigel的细胞培养器皿，移液吸头，分装管等都必须预冷后使用。
2. Matrigel基质会有色差变化（淡黄色到深红色），是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的，与5％CO2平衡后色差即会减少。冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用70％乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Matrigel呈匀浆状。
3. 溶解时可将Matrigel基质置于4℃冰箱内冰上过夜溶解。成胶后的Matrigel可以在4℃ 24－48小时后重新呈液态。

操作说明：(仅供参考)

为了保证Matrigel基质的成胶性能与稳定性，稀释浓度不应低于3mg/ml，可用预冷的无血清培养基稀释，Matrigel成胶后立即使用。

薄胶成胶方法：

1. 冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。
2. 将需要使用的培养板置于冰上，加入浓度为50μL/cm²生长面积的Matrigel基质。
3. 在37℃放置30分钟，即可使用。

厚胶成胶方法：

1. 冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。
2. 将需要使用的培养板置于冰浴，将培养的细胞与Matrigel基质混合，用移液枪头使其悬浮于基质中。加入浓度为150－200μL/cm²生长面积的Matrigel基质。
3. 在37℃放置30分钟，可成胶。可以加入细胞培养的基质，也可使细胞直接生长在胶表面。

薄层包被方法：

1. 冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。
2. 根据使用需要，采用无血清培养基稀释Matrigel基质。根据实验需要确定最佳包被浓度。
3. 将稀释的Matrigel基质包被于所需的培养器皿中，包被量至少覆盖整个器皿的生长表面。室温下孵育1小时。
4. 去除未结合的Matrigel，用无血清培养基轻轻地冲洗。