微藻叶绿体提取试剂盒

微藻叶绿体提取试剂盒

货号：C03250

规格：50T/100T

有效期：2-8℃保存，有效期一年。

产品内容：

注：

1. 未开盖使用前也可以2-8℃储存，长期不用在-20℃储存。
2. 试剂拆封后请尽快使用完！

产品简介：

叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器，光合作用就是在叶绿体中进行的, 由于具有这一重要功能，所以叶绿体一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。

微藻叶绿体提取试剂盒用简便快速的方法即可快速从各种微藻提取得到叶绿体。

自备试剂及设备：

离心机、超声细胞破碎仪、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒，PBS缓冲液、蛋白定量试剂盒，离心管、吸头、一次性手套、细胞筛（40μm/70μm）

使用方法：

1. 使用注意事项：

以下部分操作步骤针对不同的微藻样品种类需要根据预实验情况调整操作条件。

1. 操作步骤：
2. 取对数生长中期的微藻，置于4℃冰箱中避光静置24-36小时。
3. 在2000×g离心5分钟，去上清，收集沉淀微藻。
4. 沉淀用PBS洗涤一次。（2000×g离心5分钟）
5. 在3-5g微藻细胞沉淀中加入10ml微藻洗涤液A，充分混匀。
6. 室温静置2-3分钟。
7. 在2000×g离心10分钟，去上清，收集沉淀微藻。（尽可能吸干上清）
8. 在沉淀中加入10ml微藻提取液B，充分混匀。
9. 提取液B 在300w，超声3s，间隔3s条件超声处理1-15 分钟。

【注】：

①不同藻类处理时间差异较大，可以根据预实验结果情况调整超声时间。一般衣藻、小球藻处理5-8分钟，金藻2-3分钟，扁藻、甲藻、球等鞭金藻处理1分钟。

②没有超声条件可以将提取液微藻悬液加入研钵，加入少量石英砂进行研磨。

③也可以用高压细胞破碎仪破碎细胞。

9、将提取液B用40μm细胞筛过滤。（没有细胞筛可以不过滤）

10、将滤液在800×g离心3分钟，弃沉淀，保留上清。

11、将上清在3000×g离心10分钟，弃上清，收集沉淀。

12、用5ml试剂C重悬沉淀。

13、在3000×g 离心10 分钟，弃上清，收集沉淀。

14、弃上清，沉淀即为叶绿体。

15、用2ml叶绿体保存液或其他相应的缓冲液重悬叶绿体，置冰箱备用或直接用于下游实验。也可以不用试剂盒中的叶绿体保存液，根据下游实验需要，将叶绿体直接用于下游实验或者用自己的缓冲液保存叶绿体。

注意事项：

1. 产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
2. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。
3. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
4. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
5. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
6. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
7. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。