细菌核糖体提取试剂盒

细菌核糖体提取试剂盒

货号：C03320

规格：50T/100T

有效期：2-8℃保存，有效期一年。

产品内容：

注：

1. 有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2. 试剂拆封后请尽快使用完！

产品简介：

核糖体是细胞内一种核糖核蛋白颗粒(ribonucleoproteinparticle),主要由RNA和蛋白质构成,其惟一功能是按照mRNA的指令将氨基酸合成蛋白质多肽链,所以核糖体是细胞内蛋白质合成的分子机器。核糖体无膜结构，主要由蛋白质（40%）和RNA（60%）构成.核糖体按沉降系数分为两类,一类（70S）存在于细菌等原核生物中,另一类（80S）存在于真核细胞的细胞质中。他们有的漂浮在细胞内，有的结集在一起。细菌核糖体提取试剂盒可用于各种原核细菌样本的核糖体的提取。需要用于动物细胞、植物、叶绿体核糖体提取试剂盒可以联系选择其他货号的产品。可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。

适用样本：细菌

自备试剂和仪器：

离心机、超声破碎仪、移液器、PBS缓冲液、离心管、吸头、一次性手套

一、使用注意事项:

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果2.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开
2. 盖时试剂损失。
3. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
4. 如果是做核酸类下游应用，实验中所有液体以及器具均应该用DEPC处理。用0.1%的DEPC处理12小时然后高压。
5. 下游用于蛋白质类实验的话可以不用DEPC处理。
6. 细菌核糖体提取：
7. 收集对数生长期细菌细胞，离心后尽可能吸干培养基。
8. 用冷PBS洗涤两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
9. 每500mg湿重菌体中加入1mL冷的试剂A和10 μL冷的试剂B，充分混匀，置冰上30分钟。
10. 用高压细胞破碎仪或超声细胞破碎仪破碎细胞。
11. 在4 ℃，1000×g 条件下离心5分钟。弃沉淀，收集上清。
12. 将上清在4°℃，20000×g条件下离心 30 分钟，弃沉淀，收集上清。
13. 将上清在4℃℃，170000×g条件下离心 60 分钟。弃上清，收集沉淀。
14. 在沉淀中加入400mL冷的试剂C，混匀。
15. 在 4°C，170000×g条件下离心60分钟。
16. 弃上清，沉淀用核糖体保存液 D 重悬。
17. 即得到核糖体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。

注意事项：

1. 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗2.最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
2. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
3. 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
4. 如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。