线粒体活性染色试剂盒说明书
货号: C03370
规格：3×10ml
英文名称：Mitochondrial Activity Detection Kit(Janus Green B Method)
保存：-20℃，避光保存，有效期 6 个月。
产品说明（仅供参考）:
本产品仅用于科研，不可用于其他。
线粒体是细胞中重要的细胞器，其主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。在光学显微镜下线粒体呈现为颗粒状、棒状或弯曲细线。詹纳斯绿 B（Janus green B），是一种毒性较小的碱性染料。它可以对活细胞进行直接染色，在细胞质内可以看到被染成蓝绿色的线状或颗粒小体的线粒体。线粒体所以能显示出蓝绿色，是由于线粒体中具有细胞色素氧化酶系统，它使染料始终处于氧化状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质中的染料被还原呈无色。
线粒体活性染色试剂盒其适用于各种线粒体（动物、人体、植物、昆虫等）制备物的功能检测。产品严格无菌，即开即用，活体检测，操作简捷，性能稳定。
自备材料：
EP离心管、光学显微镜
操作步骤:(供参考)
实验开始前，将染色液提前从冰箱取出置于4℃里融化，并放在暗室里。然后进行下列操作。
一、纯化线粒体染色
1、从纯化的线粒体样品中移出 5-100µl (含106细胞中提取的线粒体)到新的冷1.5ml离心管置于冰槽里 (注意:线粒体须均匀分布，没有聚集成团)。
2、加入等量微升的染色液，轻柔混匀，放进暗室里，在室温下孵育1分钟。
3、即刻移取10µl到载玻片上，放上盖玻片。
4、在光学显微镜油镜下进行观察: 功能完整的线粒体呈现蓝绿色圆形或圆形颗粒。蓝绿色强度显著减
弱或呈现无色，表明线粒体细胞色素氧化酶系统功能不全或功能丧失。
二、活体细胞染色
1、将待测细胞(1×106细胞) 移入到1.5ml 离心管
2、放进微型台式离心机离心1分钟，转速为500g，小心抽去上清液
3、加入500µl清理液，加入500µl 染色液，充分混匀。
4、放进暗室里，在冰槽里孵育20 分钟，即刻移取10µl到载玻片上，放上盖玻片。
5、在光学显微镜油镜下进行观察: 功能完整的线粒体呈现蓝绿色线状或颗粒小体。
注意事项:
1、建议操作在无菌状态下进行，线粒体样品操作需在低温下进行，建议快速操作。
2、操作时，需戴手套，染色完成后，即刻进行显微镜观察分析。