精子细胞BWW培养基储存液说明书
货号：C03640
规格：500ml
保存：4℃，有效期12个月。
产品说明：
正常精液是一种混合物，在射精时由睾丸和附睾的分泌物及悬浮其中的精子与前列腺、精囊腺和尿道球腺的分泌物混合而成，最终射出的混合物是一种粘稠的液体。精子分析的方法有很多，其中可通过培养进行检测。
精子细胞BWW培养基储存液主要由氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸镁、酚红等组成，不含葡萄糖、丙酮酸钠、BSA等以及抗生素，是一种旨在用于广谱动物和人体精子细胞获能处理的常用营养液。
操作步骤（仅供参考）：
1、取干净的精液样本室温放置，使之充分液化。
2、制备精子细胞(仅供参考，不是必须步骤)：
1)、上泳法：取一个无菌的15ml锥底离心管，加入1ml液化的精液，在其上方轻轻加入1.2ml Earle培养液形成液层，45°倾斜试管，37℃孵育1h。轻轻竖立试管，取出最上层的1ml液体。加入8ml增补的Earle培养液稀释。以 300～500g离心 5分钟，弃上清。加入培养液0.5ml重新悬浮细胞，用于精子密度或功能的评估。
2)、非连续密度梯度法：在试管中制备密度梯度液， 下层为 1ml 80%（v/v）、 上层为 1ml 40%（v/v）的密度梯度液。将 1ml 精液放入密度梯度液上方，以 300～400g离心 15～30分钟。 必要时，每份精液标本可用一个以上的试管。弃去精子沉淀团上的绝大部分上清液。用 5ml 培养液重悬精子沉淀团，轻轻吹打（有助于洗去密度梯度液），然后以200g离心 4～10分钟。弃去精子沉淀团上的绝大部分上清液。用 5ml 培养液重悬精子沉淀团， 轻轻吹打（有助于洗去密度梯度液），然后以200g离心 4～10分钟。用1ml培养液重悬精子沉淀团。
3、将含有精子细胞的离心管置于37℃含5%CO2、95%空气的细胞培养箱中孵育3h。如无上述培养箱，可用含Hepes的缓冲培养液，拧紧管盖，置于37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程中，大多数活动的精子从精浆中游离到覆盖上面的培养液内。
4、离心精子悬液，使精子细胞密度接近于10×106/ml，将精子重悬于0.5ml精子细胞BWW培养基中，并在37℃含5%CO2、95%空气的细胞培养箱内孵育18～24小时。如无上述培养箱，可用含Hepes的缓冲培养液，拧紧管盖，置于37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程中，将试管倾斜与水平面成 45°角。将试管恢复垂直位置 20分钟，使获能后不活动的精子沉降下来。
注意事项：
1、注意无菌操作，尽量避免污染。
2、如无Earle培养液和增补的Earle培养液，可用精子细胞BWW培养基代替。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。