产品详情
细菌裂解液说明书
货号:C03650
规格:100ml
保存:2-8℃,1年
产品说明:
细菌裂解缓冲液,由NaH2PO4、NaCl、Tween-20等成分组成,裂解后分离纯化的蛋白可用于SDS-PAGE电泳。
使用说明(仅供参考):
- 将所收集的菌体重悬于5mL细菌裂解缓冲液中。
- 加入50 μL 100 mgImL溶菌酶,冰上放置30 min,超声波破碎5 mi。
- 超声完毕后,依次加入0.5 μL 5 U/mL DNasel,5 μL 10 μg/mL RNaseA, 125μL
1mol/LMgCl2,250 μL 20% TrionX-100,4℃放置30min。
- 14000×g 离心10min,分别取部分上清、沉淀以备后续试验。
- 将剩余上清,过Ni-NTA His·Bind层析柱(或具体实验要求层析柱及相关试
剂),5 mL洗涤缓冲液(含50mM NaH2PO4∶2 H2O,0.3M NaCl,0.05% Tween-20,10mM咪唑,pH8.0)
- 洗His层析柱后,加5 mL洗脱缓冲液(含50 mM NaH2PO4∶2 H2O,0.3 M
NaCl,0.05% Tween-20,250 mM咪唑,pH7.0),收集目的蛋白。
- 将收集的上清、沉淀、纯化后蛋白,10% SDS-PAGE电泳鉴定。
注意事项:
- 我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。
- 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。