鹅脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒
规格：3×200 mL/kit
保存：本产品对光敏感，应该室温避光储存，保质期 2 年。无菌开封后，保存于室温。
组成：
各种动物脏器组织淋巴细胞分离液 200mL
全血及组织稀释液 200mL
细胞洗涤液 200mL
淋巴细胞分离方法
1. 制备脏器组织的单细胞悬液。
2. 取一支适当的离心管，加入与脏器组织单细胞悬液等量的分离液 (分离液最少不得少于3 mL ，总体积不能超 过离心管的三分之二，否则会影响分离效果) 。
3. 小心吸取单细胞悬液加于分离液液面上，注意保持两液面界面清晰。 (可以使用巴氏德吸管吸取单细胞悬液， 然后小心的平铺于分离液上，因为两者的密度差异，将形成明显的分层界面。)
4. 室温，500~900g ，离心20~30min 。 (根据脏器组织单细胞悬液的量确定离心条件，单细胞悬液量越大，离心 力越大，离心时间越长，具体离心条件可以自行摸索，以达到最佳分
离效果) 。
5. 离心后，此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层为稀释液层；第 二层为环状乳白色淋巴细胞层；第三层为透明分离液层；第四层为红 细胞层。
6. 用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层至另一洁净的15mL离 心管中，向离心管中加入10ml细胞洗涤液洗涤白膜层细胞，250g ，离 心10min。
7. 弃上清，5mL的PBS或细胞清洗液重悬细胞，250g ，离心10min。
8. 重复步骤7
9. 弃上清，细胞重悬备用。
脏器组织单细胞悬液的制备方法
脏器组织研磨的方法：
1. 无菌条件下摘取脏器组织，撕去被膜，用眼科剪将脏器组织剪成小块。
2. 将尼龙筛网或者是细胞过滤筛放置于平皿上，加入少量全血及组织稀释液 (保证脏器组织及获得的细胞处于 液体环境中) 。
3. 将脏器组织放置于筛网上，使用注射器活塞或者是无菌镊子来研磨脏器组织 (尽量控制研磨力度，保持筛网 悬空，避免在皿底上直接研磨而造成大批细胞死亡)
4. 研磨完全后使用全血及组织稀释液冲洗筛网，收集细胞悬液，再经滤网过滤。
注：
A. 可用酶消化法，使用胶原酶对脏器组织组织进行消化，得到单细胞悬液。
B. 如果最终得到的细胞需要培养，那全过程所需试剂与器材均要求无菌。
C. 根据脏器组织的体积控制单细胞悬液的浓度在108~ 109个/mL。
注意事项：
A. 开封前颠倒混匀，本分离液为无菌产品，为延长分离液保存时间，请在无菌条件下启封，避免微生物污染。
B. 分离液使用时应始终保持室温 (18℃~25℃) ，如室内温度较低，可将分离液预热。4℃或者是温度较低的条 件下离心，可能会导致白膜层中红细胞污染加重。
C. 待分离的组织要求新鲜，避免冷冻和冷藏。
D. 部分塑料制品 (如聚苯乙烯) 因其带有的静电作用，可能会导致细胞挂壁影响分离效果。
E. 如果要进一步对分离的细胞进行培养，那在制备单细胞悬液和分离过程中，注意无菌操作，避免微生物污染。