12% SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒
货号：D00410
规格：25T/50T
保存：2-8℃避光保存，有效期1 年。
产品简介：
25T | 50T | 保存条件 | |
12% SDS-PAGE分离胶预混液 | 200mL | 200mL×2 | 4℃，避光 |
5% SDS-PAGE浓缩胶预混液 | 100mL | 100mL | 4℃，避光 |
PAGE胶凝固剂 | 1g | 2g | 干粉 4℃；溶液 -20℃ |
PAGE胶促凝剂 | 0.8mL | 1.5mL | 4℃，避光 |
操作步骤(仅供参考)：
1、10%PAGE 胶凝固剂配置方法，取0.1g PAGE 胶凝固剂加入1mL 蒸馏水，待其完全溶解，即为10%PAGE胶凝固剂。
2、在12% SDS-PAGE 分离胶预混液，按照1%的比例加入相应量的10%过硫酸铵或其替代物溶液，按照0.01%的比例加入相应量的TEMED。例如10ml 12% SDS-PAGE 下层胶预混液中，加入100μl 10%过硫酸铵或其替代物溶液和10μl TEMED 或其替代物溶液。适当混匀后倒入到制胶模具中，用异丙醇或蒸馏水封住液面，直至下层胶凝固充分。
3、去除分离胶上面覆盖的液体，尽量去干净，然后倒入添加了10%PAGE 胶凝固剂溶液和PAGE 胶促凝剂的5%SDS-PAGE 上层胶预混液，插入梳子，待上层胶凝固后，则表明制胶步骤结束，可以准备进行后续的电泳了。通常30-60 分钟内胶会凝固。具体的凝固时间和温度及光照有关。（参考下表）
成分 | 配制不同体积分离胶预混液所需各成分的体积 ( mL) | |||||
12%SDS-PAGE分离胶预混液 | 5 | 10 | 15 | 20 | 30 | 50 |
10%PAGE胶凝固剂 | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.3 | 0.5 |
PAGE胶促凝剂 | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 | 0.03 | 0.05 |
成分 | 配制不同体积浓缩胶预混液所需各成分的体积 ( mL) | |||||
5%SDS-PAGE浓缩胶预混液 | 2 | 5 | 10 | 20 | 30 | 50 |
10%PAGE胶凝固剂 | 0.02 | 0.05 | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.5 |
PAGE胶促凝剂 | 0.002 | 0.005 | 0.01 | 0.02 | 0.03 | 0.05 |
注意事项：
1、在冬天室温较低时，可以自行再额外添加少量TEMED 以促进凝胶凝固；也可将胶放37℃温箱凝固。
2、SDS-PAGE 分离胶预混液中含有SDS，若低温放置出现沉淀，可使溶液恢复室温后，待沉淀溶解后再使用。
3、PAGE 胶促凝剂和10%PAGE 胶凝固剂最后加，在加入前需混匀前面所加试剂。10%PAGE 胶凝固剂溶液在4℃有效期为一周；PAGE 胶促凝剂易挥发，使用后请盖紧瓶盖。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。