免染PAGE凝胶快速制备试剂盒 (10% )

免 染 P A G E 凝 胶 快 速 制 备 试 剂 盒

货 号 ：D00650/D00660/D00620/D00630/D00640

规格：20T/50T

保 存 ： 2 - 8 ℃，避 光 ，有 效 期 1 年 。

组 成 ：

产品介绍：

免染PAGE凝胶快速制备试剂盒提供了配制蛋白变性电泳凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器 及蒸馏水，即可配制SDS-PAGE彩色凝胶进行蛋白质电泳。本试剂盒根据不同的制胶板厚度约可配制20-40 块电泳凝胶。

本试剂盒所制备凝胶适用于Tris-Glycine体系电泳，不需要额外加入TEMED即可制备SDS-PAGE凝 胶，其中上层胶(浓缩胶)添加有色颜料，点样孔清晰易辨，便于上样，改良后的下层胶(分离胶)可与上 层胶显著分层，可在灌注下层胶后无需水或醇类试剂封闭直接灌注上层胶同时凝结，减少配胶时间。电泳 或转膜结束后可将凝胶整块取下浸于缓冲液中置于凝胶成像仪中直接成像观察电泳状况和转膜效率，同时不影响后续化学发光或组学检测，有助于提高检测效率。

操 作 步 骤 ： ( 仅 供 参 考 )

本产品上层胶浓度5%,下层胶6%/8%/10%/12%/15%,如需其他浓度需现询。SG稀释液颜色随机发放，不同颜色SG稀释 液可混用，如需其他颜色需现询。

1. 将制胶模具装配好，以一块1.50mm厚的mini胶为例。(0.75mm和1.00mm数据见表1)

表1 不同厚度制胶板推荐配制凝胶量

2. 取等体积的RG储备液和RG稀释液各4mL,放入配胶杯中混匀，制成下层胶预制液。

3. 取SG储备液和SG稀释液各1.4 mL,放入配胶杯中混匀，制成上层胶预制液。

4. 向下层胶预制液内加入10%凝固剂80l,轻轻搅拌或摇晃混匀，避免产生气泡。(见注意事项2)

5. 向制胶模具中加入步骤4中混匀后的下层胶溶液，使液面距离玻璃板上沿约1.5 cm处即可。

6. 向上层胶预制液中加入28ul的10%凝固剂，轻轻搅拌或摇晃使其混匀，避免出现气泡，不需要等待 下层胶凝固，可直接将混匀后的溶液缓慢灌注到下层胶溶液上面，插入梳子。 (注意：加入下层胶后 要在2 min内将上层胶注入凝胶模具内，且在灌注上层胶时要缓慢，防止上层胶与下层胶混合在一起， 若上层胶灌注不小心产生气泡，则可以用枪头轻轻扫下，赶走气泡)

7. 室温(25℃)静置约15min,待上层胶完全凝固，小心地拔出梳子，即可进行常规电泳。

注 意 事 项

1. 向制胶器中加液时一定要缓缓加入，不可急躁，避免气泡的产生。

2. 凝固剂添加量与凝固时间直接相关，操作步骤中添加比例可保证10-20min全胶凝胶完毕。如需同时配 制多块凝胶建议适当减少凝固剂添加比例(±20%)或使用压胶试剂分层配置凝胶。

3. 蛋白条带的分辨率和电泳美观度与电泳条件相关，如果想跑出清晰，美观的条带，建议电泳时电压在100- 120V之间，如需快速电泳可适当加压至160-200V,高电压下建议冰浴电泳，防止烧胶。

4. 配置好的10%凝固剂如需长期保存建议分装冻存，在-20℃可保存1年。

5. 彩色上层胶中含有染料，因染料本身性质，长期静置后可能会产牛沉淀，使用前请小心混匀。

6. 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算，为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品 性能，将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。

7. 本品仅适用于变性蛋白凝胶电泳，非变性蛋白凝胶电泳请选取我司其他产品。