Lowry法蛋白浓度测定试剂盒 (带附件:BSA标准品 1mL×1支 )

Lowry 法蛋白浓度测定试剂盒说明书

货号：D02180

规格：1000T(微孔)

保存：BSA蛋白标准品4℃保存有效期至少3个月，-20℃保存有效期至少一年，其他试剂室温保存有效期至少一年。试剂开封使用后请及时密闭保存，Folin酚乙试剂颜色变成深绿色即失效。

试剂盒组成：

产品简介：

Folin-酚试剂法包括两步反应：第一步是在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物；第二步是此络合物将Folin 试剂还原，产生深蓝色，颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5～500μg/ml 蛋白质。Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起，因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外，不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。

操作步骤：

1.根据需要量，取适量Folin 酚甲试剂A 和B 按50:1 混合，混合后有效期为24 小时，过期失效。

2.根据需要量，取适量BSA 标准品用PBS 稀释稀释10 倍至浓度0.5mg/ml。

若采用酶标仪法(96 孔)

3.将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul 加到96 孔板中，加PBS 补足到20ul。

4.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度)，加20ul 到96 孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点误差比较大，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2 后。

5.将配好的Folin 酚甲试剂每孔加入200ul，轻轻震动，混匀，室温放置10 分钟。

6.各孔加入20 微升Folin 酚乙试剂，迅速混匀，37℃放置30 分钟。用酶标仪测定A650 计算蛋白浓度。

若采用分光光度计法（接上述步骤2）

3.取八支（或者更多）5ml 离心管，标号，按下表加入试剂。

4.混匀，37℃放置30 分钟。分光光度计测定A650 。

1. 绘制曲线，计算蛋白浓度。

注意事项：佩戴手套，规范操作