骨组织蛋白提取试剂盒 (2D电泳用 )

骨组织蛋白提取试剂盒说明书

货号: D03160

规格：50T/100T

保存：2-8℃保存，有效期1年。

产品组成：

产品说明（仅供参考）:

该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

骨组织蛋白提取试剂盒适用于从各种动物密质骨，疏松骨和软骨组织样本中提取总蛋白。骨组织蛋白提取液含有多种有效成分，可以充分释放骨组织蛋白。试剂中的蛋白酶抑制剂混合物，尽量保证了蛋白的完整性。提取的蛋白可用于Western Blot、蛋白质电泳等下游蛋白研究。提取过程简单方便，可在1小时内完成。

操作步骤

1. 取新鲜骨组织，在预冷的1×PBS中充分浸泡，去除骨头上的筋膜和血水，将骨头剪开去除里面的骨髓，然后泡在纯水清洗。
2. 将骨组织剪碎，称重后放入盛有液氮的研钵中，研磨成细粉，保持液氮不能完全挥发。
3. 将骨组织粉末加入离心管中，按每200mg骨组织加入500μL试剂A和2μL试剂B。
4. 混匀后在4℃下震荡20min（也可放在冰上，每5分钟震荡一次）。
5. 超声破碎，100w，超声开5s关5s间隔条件下，冰浴超声2min。
6. 在4℃，12000xg离心10min，取上清于离心管中。

注：如需要对提取的蛋白进行浓缩处理，进行步骤7-9(不需浓缩处理步骤7-9可以跳过)，需自备丙酮试剂。

1. 在上述离心管中加入3倍体积的丙酮（如吸取300μL上清加900μL丙酮），用移液枪吹吸混匀后放入-20℃冰箱中静置20min。
2. 在4℃，12000×g离心5min，弃上清。
3. 向沉淀中加入50-100μL试剂C。
4. 将蛋白提取物放-80℃保存。

注意事项：

1. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
2. 蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存，避免反复冻融。
3. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
4. 产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
5. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。