产品详情
细菌脂多糖（LPS）提取试剂盒
货号：D03560
规格：50T/100T
有效期：2-8℃保存，有效期一年。
产品内容：
名称 | 50T | 100T | 储存条件 |
组分A：试剂A | 50ml | 100ml | 2-8℃保存 |
组分B：提取液B | 25ml | 50ml | 2-8℃保存 |
组分C：提取液C | 25ml | 50ml | 2-8℃保存 |
产品简介：
脂多糖（LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分，结构很复杂、热稳定性极高（在250℃下干热灭菌2h才完全灭活）。受LPS发现的历史原因，如今LPS的概念几乎等同于内毒素（endotoxin）。LPS由多糖链和脂质A组成，不同细菌间的多糖链是高度变化的，决定细菌的血清型；而脂质A主要影响LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动，包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。
由于LPS与机体免疫机能的密切关系，生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究，如阐明LPS的结构，代谢，免疫学，生理学，毒性，生物合成途径；诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌；诱导疾病研究的动物模型如炎症反应，急性肺损伤。
LPS提取试剂盒采用简单步骤即可快速提取细菌脂多糖，提取产量高，省时，蛋白质，核酸污染低。
产品特点：
- 适用性广，能从所有革兰氏阴性菌中提取 LPS。
- 操作简单方便。
- 提取 LPS 下游应用广，包括直接用于免疫刺激。
使用方法：
一、使用注意事项：
- 离心机转速有相对离心力（RCF，×g）和每分钟转速（RPM）两种表示方式，有些离心机设置有 RPM 和×g 显示切换，但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算：g=r×1.118×10-5×rpm2 （r 为有效离心半径，即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度，单位为厘米) 例如: 转速为 3000rpm，有效离心半径为10 cm，则相对离心力（RCF，×g）为=10×1.118×10-5×30002=1006.2（×g）。
- 可以用试剂盒或者苯酚硫酸法进行脂多糖定量。
二、脂多糖（LPS）提取操作步骤（仅供参考）：
- 室温 8000×g 离心 3 分钟收获细菌细胞。
- 加入 500μl 试剂 A 重悬细菌，8000×g 离心 3 分钟，弃上清。
注：每次处理 50-200mg 湿重菌体均可。
- 收集沉淀，加入 500μl 试剂 A 重悬沉淀，8000×g 离心 3 分钟，弃上清。
- 收集沉淀，加入 500μl 提取液 B 重悬沉淀。
- 在 150-300w 超声 10 秒间隔 10 秒，超声 5-15 分钟。
注：没有超声条件可以不超声；如果超声时出现黑色沉淀，说明超声功率过大，需要降低功率；避免产生泡沫。
- 在 10000×g 离心 10 分钟取上清。
- 在上清中加入 500μl 提取液 C，剧烈涡旋 20 秒充分混匀。
- 在 66-68℃水浴或气浴孵育 30 分钟。中间隔 10 分钟用移液器轻轻吹打混匀。
- 置 4℃静置过夜。
注：急用的样本可以将 4℃静置时间缩短至 2 小时。
- 在 4℃，3000×g 离心 20 分钟。
- 取最上层上清至另一干净离心管，即得脂多糖样品。
注：样品中含有盐。如果有需要可以透析或超滤脱盐后在用于下游实验。透析或超滤脱盐后冻干称重，根据需要溶解到合适浓度用于下游实验。
注意事项：
- 产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
- 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
- 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
- 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
- 如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。