产品详情
重组肠激酶说明书
货号:E04220
规格：500U
酶活效价：见标签
来源：重组大肠杆菌
理论MW：25,850Da
活性：1U定义为在25℃，12h~16h之内，将50 μg保存于25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中的融合蛋白切割95%所需的酶量。
保存：-20℃保存，有效期1年。
产品说明（仅供参考）:
该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
肠激酶是一种高纯度的重组牛肠激酶。该酶经HPLC纯化，纯度高，特异性高，并且不含其他蛋白酶。肠激酶（EC3.4.21.9）是一个特定的蛋白酶，它可以切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点：天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-赖氨酸。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签。
产品优势：
高特异性：
- 特定的蛋白酶，切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点：天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-赖氨酸（DDDDK）
- 不含其他蛋白酶，无非特异性切割
高纯度：
图一：SDS-PAGE检测结果，纯化的肠激酶一个单一的主带；
图二：1U的EK作用于50μg底物0min，10min，20min，30min，40min，50min，60min后的SDS-PAGE分析；
图三：1U，2U，5U，10U的EK作用于50μg底物4h后和1U的EK作用于50μg底物16h后的SDS-PAGE分析。
使用说明（仅供参考）
- 酶切条件：
按照酶活性定义，重组EK酶切条件举例：25mM Tris-HCl pH 8.0体系中：
融合蛋白浓度 0.1-1mg/ml（蛋白总量50-100µg）
重组EK用量 1-2U
温度 25℃过夜酶切，或完全酶切需12h-16h。
- 常见影响肠激酶活性的因素：
在＞200mM咪唑，或＞200mM NaCl，或＞5%甘油，酶切效果受影响。可参照以下推荐方法进行酶切：
- 为获得理想酶切结果，请将样品透析到25mM Tris-HCl pH 8.0缓冲液中，再进行酶切。
- 若不便透析，可将样品稀释，咪唑含量在100mM以下，NaCl浓度在50mM以下，甘油浓度小于5%以下进行酶切，酶的用量与蛋白的比例不变（即1U酶切50µg蛋白）。
- 如果样品溶液中含有上述成分中的一种或多种，且不便去除，此时适当增加酶量或延长酶切时间，也可达到较好酶切效果。
注意事项：
- 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
- 产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。