钙黄绿素乙酰甲酯
货号: E11770
规格:1mg
英文名称: Calcein, AM
别名: 3'-O-乙酰胺-2',7'-二(羧乙基)-4或5-羧基荧光素,二乙酰甲酯
CAS: 148504-34-1
分子式: C46H46N2O23
分子量: 994.86
纯度: ≥90%(HPLC)
外观: 白色或浅黄色晶体
保存条件: -20°C干燥避光保存，保质期12个月。
产品说明:
本产品仅用于科研，不可用于其他。
Calcein, AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Calcein，从而被滞留在细胞内，发出强绿色荧光。与其它同类试剂（如 BCECF, AM和CFDA）相比，Calcein, AM的细胞毒性很低。Calcein的激发和发射波长分别为 490 nm和515 nm。
Calcein, AM仅对活细胞染色。作为核染色染料的PI 不能穿过活细胞的细胞膜，它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的 DNA双螺旋从而产生红色荧光（激发：535 nm，发射：617 nm），因此 PI 仅对死细胞染色。由于 Calcein和PI-DNA 都可被490 nm激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用545 nm激发，仅可观察到死细胞。根据以上特点，Calcein, AM和PI 经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。
由于不同细胞系的最佳染色条件不同，我们建议个别确定Calcein, AM 和PI的合适浓度。
操作说明:
（1）用DMSO 制备1 mM 的Calcein, AM溶液，并用PBS 将其稀释制成1～50μM的Calcein, AM溶液a。
（2）将1/10 细胞培养基体积的Calcein, AM溶液加入到细胞培养基中b。
（3）在37℃培养细胞15～30分钟。
（4）用PBS 或适当的缓冲液洗涤细胞两次。
（5）用490 nm激发波长，515 nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
注意事项:
a.如果Calcein, AM很难进入细胞，可以使用表面活性剂，如Pluronic F127。
b.也可以用1/10 浓度的Calcein, AM溶液代替培养基。