SUMO 蛋白酶使用说明书
货号：E22150
规格：1000U(100μL)
产品内容：
试剂名称 | 规格 | 保存温度 |
SUMO蛋白酶（10U/μL） | 100μL | -80℃ |
10×SUMO Buffer | 1mL*3 | -20℃ |
3M NaCl | 1mL | -20℃ |
产品简介：
SUMO 蛋白酶，也称为 UIP 蛋白酶（分子量 26kD）， 是一种具有较高活性的半胱氨酸蛋白酶。SUMO 蛋白酶以一种非常特异的方式切割蛋白，它特异性识别 UBL 蛋白的三级结构－SUMO，而不是氨基酸序列，故该蛋白酶可以切割重组融合蛋白的 SUMO。切割的最佳温度为 30℃，该酶作用温度和 PH 范围（pH7-9）都比较广泛。酶切后，可通过 Ni-NTA Resin 亲和纯化很容易地将 SUMO 去除。SUMO 蛋白酶是自 E.coli 表达经亲和纯化的重组蛋白酶。
应用：融合蛋白标签剪切去除。
保存条件：
SUMO 蛋白酶-80℃长期保存，可存储2 年；首次使用后可置于-20℃保存，避免反复冻融。10×SUMO Buffer 可置于-20℃保存。
酶活定义：
在 1×SUMO Protease Buffer-Salt (50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 0.2% NP-40, 1 mM DTT)中，30℃ 反应 1h，剪切>85％的 2 μg 对照底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
使用方法说明：
若蛋白为热不稳定性，请在 4℃ 孵育较长时间或增加酶的用量。
1. 在 EP 管中配制如下反应体系：
融合蛋白 20 μg
10×SUMO Buffer 20μL
SUMO 蛋白酶 1-5μL
ddH2O 定容至 Upto 200μL
2. 混匀上述体系后于 30℃ 孵育，在 1、2、4、6 小时分别吸出 30 μl 上述反应液，置于单独的 EP 管中。
3. 向上述 EP 管中加入 20 μl 2×SDS Loading Buffer，置于 -20℃。
4. 取 30 μl 样品进行 SDA-PAGE 分析。
注意事项：
1. 为达到最好的酶切效果，请保证重组蛋白为部分或完全纯化的蛋白。
2. 对于大部分融合蛋白，SUMO 蛋白酶所需 NaCl 的 浓度不同的蛋白情况会有所差别，可根据实际情况在0～300 mM 之间调节 NaCl 的浓度以达到最佳的效果。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。