酵母无机焦磷酸酶

Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)说明书

货号: E23240

规格：50U

英文名称：Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)

别名：酵母无机焦磷酸酶

分子量：约33kDa

纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。

来源：由大肠杆菌表达，表达基因为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的ppa基因。

保存：-20℃保存，有效期2年。

活性定义：One unit is the amount of enzyme that will generate 1µmol of phosphate per minute from inorganic pyrophosphate under standard reaction conditions (a 10 minute reaction at 25ºC in 100mM Tris-HCl (pH7.2), 2mM MgCl₂ and 2mM PPi in a reaction volume of 0.5mL)。

Storage (Dilution) Buffer: 20mM Tris-HCl (pH8.0), 100mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50% (v/v) glycerol.

10× Reaction Buffer: 1M Tris-HCl (pH7.2), 20mM MgCl₂.

失活或抑制：Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)的活性可以被EDTA强烈抑制；亚胺二磷酸盐(Imidodiphosphate)、α,ω-glycol disphosphates、methanedial diphosphate和1,2-ethanedial diphosphate也是Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)的抑制剂。加热不能使该酶完全失活，可通过柱纯化或酚/氯仿抽提的方法去除Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)。

产品说明（仅供参考）:

该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)，中文名为酵母无机焦磷酸酶，是通过大肠杆菌表达、纯化获得的可用于催化无机焦磷酸盐(Inorganic pyrophosphate, PPi)水解为正磷酸盐(Orthophosphate)的重组酶。

多种代谢反应会产生无机焦磷酸，Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)可水解无机焦磷酸盐，从而可以避免无机焦磷酸对反应的抑制，促使反应向正向进行，从而常用于RNA体外转录、DNA复制和扩增如HDA或LAMP等温扩增等产生无机焦磷酸反应体系中促进正向反应，提高反应产物的产量。

Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)是一种金属蛋白酶(Metalloprotease)，该酶的活性受二价金属离子的影响，Mg²⁺、Zn²⁺、Co²⁺、Mn²⁺、Ca²⁺均可以提高其催化活性，在Mg2+存在的条件下活性最高。

体外转录反应中，可提高RNA的合成量；DNA聚合反应中，防止无机焦磷酸盐积累；利用焦磷酸盐测定法进行SNP基因分型的试剂中去除焦磷酸污染。

使用说明（仅供参考）

Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)在很多反应体系中有反应活性，很多时候可以直接添加到反应体系中即可有效去除反应产生的焦磷酸，促进正向反应的进行并提高反应产物的产量。

注意:保证反应体系中含有适量的镁离子可以确保Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)具有很高的活性。Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)比较理想的反应温度是25°C，但在16-37℃均有较好的酶活性。具体在不同反应体系中的用量，需要适当摸索和优化，通常可以在0.05-1 U/mL浓度范围内进行调整。比较理想的反应条件请参考相关文献资料进行。Storage (Dilution) Bufer可以用于Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)的稀释和保存。

注意事项：

1. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。
2. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
3. 产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。