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一氧化氮检测试剂盒(Griess Reagent)

货    号 E24480
产品分类 试剂
规格与价格
规格 单位 价格(元) 操作
500T ¥528 询价
产品详情

一氧化氮检测试剂盒(Griess Reagent)说明书

货号:E24480

规格:500T

保存:2-8℃避光保存,有效期1年。

产品说明(仅供参考):

该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

一氧化氮检测试剂盒采用了经典的Griess Reagent,并对其测定的溶液体系进行了优化,使检测下限达到1uM,在1-100uM范围内有非常完美的线性关系。检测速度极快,完成一条标准曲线或5-10个样品的测定只需3分钟。样品范围广,可以检测细胞或组织及其培养液中的一氧化氮的含量,酚红和10%血清均对测定无明显干扰,也可以检测血清、血浆和尿液中一氧化氮的含量。

产品组成:

组分

500T

保存条件

试剂(A):1M NaNO2

1mL

2-8℃保存

试剂(B):Griess Reagent I

25mL

2-8℃保存

试剂(C):Griess Reagent II

25mL

2-8℃保存

使用说明(仅供参考)

  1. 取出Griess Reagent I和II,恢复至室温
  2. 待测样品所用溶液稀释NaNO2标准品。例如样品为细胞培养液上清,细胞培养液为DMEM+10% FBS,则用DMEM+10% FBS稀释标准品。通常标准品的浓度可取0,1,2,5,10,20,40,60,100μM。
  3. 按50μl/孔,在96孔板中加入标准品及样品。样品为培养液上清,可以直接取样,如果有沉淀物则需离心后取上清。如样品为细胞或组织,可以快速冻融裂解,然后离心沉淀取上清,体积不足50μl可以用重蒸水或0.9%NaCl稀释(相应地标准品也需用重蒸水或0.9%NaCl稀释)。
  4. 按50μl/孔,在各孔中加入室温Griess Reagent I。
  5. 按50μl/孔,各孔中加入室温Griess Reagent II。
  6. 540nm测定吸光度。如无540nm滤光片,520-560nm的滤光片也可。如无酶标仪或合适的滤光片,也可以通过目测比色,确定样品中一氧化氮的浓度。目测比色时标准品需要更为精细的浓度梯度。
  7. 以标准品浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线,根据标准曲线计算出样品中一氧化氮的浓度。

注意事项:

  1. 如溶液变色或沉淀,可能为保存不当导致的溶液失效,请购买新的试剂盒。
  2. 不建议使用RIPA裂解液对细胞或者组织进行裂解,使用RIPA裂解液可能在后续反应中产生沉淀,影响测试。
  3. 对于血清样品中NO含量的测定,粗略地计算,可以直接用水稀释标准品,从而计算出血清样品中NO的浓度。比较精确地计算,如果测定的正常血清是常见血清可以从文献上查到其中NO的浓度,然后用该已知NO浓度的血清稀释标准品,这样就可以得到比较精确的NO浓度。或者使用已知浓度的人或其它动物的血清稀释标准品也同样可以达到目的。或者参照类似文献进行血清中NO浓度的测定。
  4. 产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。