Taq Plus DNA Polymerase (含10× PCR buffer 预混氯化镁 )

Taq plus DNA Polymerase说明书

货号：M00020

规格：500U/1000U

浓度：5U/μL

保存：-20℃保存, 有效期至少一年。

产品简介：

Taq Plus DNA Ploymerase是Taq酶和Pfu酶的混合物，既有5’→ 3’核酸外切酶活性，又有3’→5’核酸外切酶活性。Taq Plus DNA Ploymerase兼具Taq DNA Ploymerase的高效率及Pfu DNA Ploymerase的高保真性的特点。与Taq酶相比，Taq Plus DNA Ploymerase具有扩增长度增加(对模板有效扩增长度可达10kb)、保真度好等优点；与Pfu酶相比，具有扩增速度快、反应效率高的优势。常用于一些对保真度要求高和模板结构复杂(如GC含量高、有二级结构等)的PCR扩增。其PCR产物可直接进行TA克隆，如需提高克隆效率，建议先纯化，加A后再进行TA克隆。

活性定义：

1单位(U) Taq plus DNA Polymerase活力定义为在74℃，30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

质量控制：

SDS-PAGE检测Taq plus DNA Polymerase纯度大于99%；经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA；能有效地扩增人类基因组中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。

酶贮存缓冲液：

20mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 mM KCl ; 50% glycerol；其他成份。

适用范围：

用于DNA的高保真扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变的分析（SNP）和末端补平等。

建议PCR体系（以50μl反应体系为例）

Template <0.5μg

上游引物（10μM） 1μl

下游引物（10μM） 1μl

10×Buffer（含Mg²⁺） 5μl

dNTP（各2.5mM） 4μl

Taq plus DNA Polymerase 0.5-1μl

ddH₂O up to 50μl

注意事项：

1、PCR反应体系加样时，最后一步加入Taq Plus DNA Ploymerase，整个过程宜在冰上操作。

2、取Taq DNA Ploymerase做PCR反应时，请用高压灭菌处理过的吸头。

3、10×Taq Plus Buffer中含15 mM Mg²⁺，如PCR反应需要较高Mg²⁺浓度，请另行加入。

4、一般情况下，Taq Plus DNA Ploymerase 可以很好地扩增10kb以下的片段。能否成功扩增更长的片段，主要与模板的结构和引物的设计有关，如果扩增长片段有困难，最好选用Long Taq DNA Ploymerase。