10× PCR Buffer (with Mg2+)说明书
货号: M00130
规格: 1mL
别名: 预混氯化镁Buffer
外观: 无色透明液体
级别：PCR级
保存条件: -20℃，1年
产品说明:
本产品仅用于科研，不可用于其他。
本产品常作为Taq酶配套试剂，共同加入PCR体系中。
使用说明（仅供参考）：
- PCR反应体系的设置：
a.融解并混匀PCR反应所需的各种溶液。将Taq DNA Polymerase置于冰浴上或冰盒内。
b. 参考下表在冰浴上设置PCR反应体系(如果有多个类似的PCR反应，可以先配制大体积的包含水、buffer、dNTP和Taq酶的混合物，然后分装到各PCR反应管内。根据情况，有时混合物中可以包括引物，有时Taq可最后单独加入。
注意I：(a) 通常引物的终浓度为0.2μM时可获得良好的检测效果，也可以根据情况在0.1-1.0μM范围内调整引物的终浓度。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度。 (b) 对于不同类型的模板在50µl反应体积中推荐用量如下： 哺乳动物基因组DNA：0.1-1µg；大肠杆菌基因组DNA：10-100ng；质粒DNA：0.1-10ng。过多的模板DNA容易 导致非特异性的PCR产物。 c. 用移液器轻轻吹打混匀或轻微Vortex混匀，室温离心数秒，使液体积聚于管底。 d. 如果所使用的PCR仪有热盖则省略本步骤。如果PCR仪没有热盖，则在管内滴入一滴矿物油(mineral oil，ST275)。 e. 把设置好的PCR反应体系置于PCR仪上，开始PCR反应。
- PCR反应参数的设置可以参考如下示例（可依据具体实验自行调整）：
STEP1(起始变性): 94ºC 3min
STEP2(变性): 94ºC 30sec
STEP3(退火): 55ºC 30sec
STEP4(延伸): 72ºC 1min
STEP5(循环): Go To STEP2 for 30 cycles
STEP6(最终延伸): 72ºC 10min
STEP7(临时保存): 4ºC forever
注意II：
- PCR反应的设置需根据模板、引物、PCR产物的长度和GC含量等条件的不同设定不同的PCR反应条件包括温度、时间 和循环数等。 b. STEP4(延伸)的时间设置需根据PCR产物的长度进行设置，通常每kb产物的延伸时间为1分钟。例如PCR产物的长度为 1kb，则延伸时间可以设置为1分钟，PCR产物的长度为2kb，则延伸时间可以设置为2分钟，以此类推。 c. 对于初次进行的PCR，为尽量确保可以扩增出预期的PCR产物，可以把循环数设置为35。对于需进行半定量或定量的 PCR反应循环数一定要进行适当优化，使PCR反应没有达到平台期。
注意III:
- 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
- 产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。