产品详情
2×Green qPCR Mixture 体系使用说明书
货号：M00290
规格：50T/200T（本试剂中不含ROX Dye）
保存：本产品-20℃保存有效期至少一年。
产品简介：
本体系是用于染料法（SYBR Green I）实时荧光定量的预混体系。产品含有优化浓度的HotStart Taq DNA Polymerase、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液和稳定剂等成分。主要用于基因组DNA 靶序列和RNA 反转录后cDNA 靶序列的检测，如基因表达分析，拷贝数分析，SNP 基因型分析等，适用于不同类型荧光定量PCR。
本体系为2×预混实时荧光定量PCR 反应体系，使用时只需加入模板、引物和水，使其工作浓度为1×，即可进行反应。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度地减少人为误差、节约PCR 实验操作时间、降低污染几率。*当两步法扩增效率不好的时候建议选择三步法进行qPCR 反应。
操作步骤：(标准操作流程)
1． 按照下表配制反应体系
组分 | 体积 |
DNA模板 | 1 μl |
上游引物 (10 μM) | 0.5 μl |
下游引物 (10 μM) | 0.5 μl |
2× Green qPCR Mixture | 10 μl |
DEPC-ddH2O | 补至 20 μl |
2. 反应设置
两步法流程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 94℃ | 2 min |
变性 | 94℃ | 15 sec |
退火 -延伸 | 60℃ | 30 sec |
40-50个循环 | ||
融解曲线 | 机器默认设置 |
三步法流程 * | 温度 | 时间 |
预变性 | 94℃ | 2 min |
变性 | 94℃ | 15 sec |
退火 | 60℃ | 15 sec |
延伸 | 72℃ | 30 sec |
40-50个循环 | ||
融解曲线 | 机器默认设置 |