产品详情
DNA退火缓冲液（5X）
货号：M00460
规格：1mL/5mL
保存：-20℃，有效期至少 12 个月。
产品简介：
DNA 退火缓冲液(Annealing Buffer for DNA Oligos)，即 DNA 寡核苷酸退火缓冲液，该退火缓冲液不仅可以用于常规的DNA Oligo的退火，而且特别适合于较难退火的用于siRNA质粒构建的DNA Oligo 的退火。使用 DNA 退火缓冲液（5×）可以有效避免 DNA Oligo 自身形成发夹结构，并且两条 Oligo 退火后可以直接和经酶切纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。 使用本试剂操作非常简单，只需把待退火的 DNA Oligo 和 DNA 退火缓冲液（5×）按照一定比 例混合后，置于 PCR 仪上，约 60 分钟即可完成。
操作步骤(仅供参考)：
1. 用去离子水将 DNA 退火缓冲液（5×）稀释成 1×工作浓度。
2. 用 DNA 退火缓冲液（1×）分别溶解互补的两条 DNA 寡核苷酸单链，使它们的摩尔浓度相等；
3. 取相同体积的步骤 2 中得到的寡核苷酸单链溶液混合，置于 PCR 反应管中，样品不要用矿物 油覆盖。
4. 将 PCR 反应管置于 PCR 仪中，设置反应条件： 95℃变性 2min；缓慢降温至 25℃，降温过 程用时至少 45min；产物可 4℃短暂保存，用于后续实验。长期保存可于-20℃冻存。
注意事项：
1. DNA 退火缓冲液(5X) 只适合于 DNA oligo 的退火，不能用于 RNA oligo 的退火。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。