Multipurpose SNP Genotyping qPCR MIX说明书
货号: M00860
规格：1mL
别名：SNP分型专用qPCR 预混液
保存：-20℃,如需频繁使用，可存放于2-8℃,尽量避免反复冻融
产品内容：
Component | 1mL |
2×Multipurpose SNP Genotyping qPCR MIX ddH2O | 1 mL 1 mL |
产品简介
Multipurpose SNP Genotyping qPCR MIX是针对探针法SNP分型的实时 荧光定量2×PCR预混体系，包括Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、Mg²+ 以及增强剂和稳定剂，操作简单方便。独特的PCR缓冲体系对血液、唾液等复杂模板 有极强的耐受性，不仅可以对提取后的DNA进行高效扩增，而且支持口腔拭子液和终 浓度不高于15%的血液直接扩增，无需繁杂的提取及保存过程。分型结果快速、准确。
实验前准备及重要注意事项
1. 使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2. 避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃ 避光保存。如果在短期内需要频繁使用，可在2-8℃保存。
操作步骤
以初次进行分型的引物为例：
1. PCR反应体系
试剂 | 25 μL体系 | 终浓度 |
2×Multipurpose SNP Genotyping qPCR MIX | 12.5 μL | 1 x |
Primer Mix ，10 μM each | 1 μL | 0.2 μM |
Template DNA | 适量 | |
ddH2O | Up to 25 μL |
2. 以需要分型的不同基因型标准品为模板，分别进行退火温度的优化，从而达到更好 的分型效果。
3. 模板处理。血液模板可直接使用ddH2O稀释至不同浓度进行扩增，推荐使用终浓度 2%血液作为模板进行分型扩增；口腔拭子模板，可将拭子在口腔内壁轻轻刮拭6次
左右并置于400 μL—1000 μL ddH2O中振荡混匀后直接用作模板。
- PCR反应程序：
本品可采用两步法PCR反应程序
步骤 | 温度 | 时间 | |
预变性 | 95℃ | 30s | |
变性 | 95℃ | 10s | |
退火/延伸 | 60℃（依引物而定） | 30s采集信号 | 45个循环 |
注意：
1）采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因导致信号较低或CT值较大的情况，可尝试三步法PCR扩增。
2 ）实时采集信号曲线法分型及最终采集信号终点法分型均可。