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血液直接PCR试剂盒 (去红细胞 )

货    号 M01990
产品分类 分子生物学
规格与价格
同货号共 2 个规格,已合并到当前页面展示
规格 单位 价格(元) 操作
100T ¥1120 询价
50T ¥670 询价
产品详情

血液直接PCR试剂盒(去红细胞)说明书

货号: M01990

规格:50T/100T

保存:-20℃保存,有效期1年。

试剂盒内容:

产品名称

50T

100T

保存条件

试剂A

25mL

50mL

-20℃

试剂B

3mL

6mL

-20℃

试剂C

200μL

400μL

-20℃

dNTPs

100μL

200μL

-20℃

10×PCR Buffer

500μL

1mL

-20℃

DNA聚合酶

60μL

120μL

-20℃

产品简介:

去红细胞法直接PCR试剂盒,经试剂A和试剂B处理后的裂解产物就可直接作为PCR模板,无需对血液进行基因组DNA的提取。

产品特色:

  1. 所需样本量极少。
  2. 无需高质量的模板就能进行PCR反应,节约时间和成本,适用性广等优点。

操作步骤:

  1. 取50μL全血于1.5mL离心管中,加入150μL试剂A,轻轻涡旋或颠倒混匀,于室温静置10min。
  2. 13000rpm,离心1min,移液器小心吸取,弃上清。
  3. 向沉淀中加入150μL试剂A,轻轻吹起沉淀,13000rpm,离心1min,移液器小心吸取,弃上清。
  4. 重复步骤3。
  5. 向沉淀中加入49uL试剂B和1μL试剂C,用移液器吸头反复吸打混匀。
  6. 上述液体55℃加热15min,95℃加热5min。12000rpm,离心1min,上清即为PCR反应体系的DNA模板。

PCR反应体系:

PCR反应成分

25μL体系

模板

2μL

10×PCR Buffer

2.5μL

dNTPs

0.5μL

正向引物(10μM)

1μL

反向引物(10μM)

1μL

DNA聚合酶

1μL

灭菌水

补足至25μL

PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5min

1

变性

94℃

15s

30

退火

56℃

30s

延伸

72℃

1min/kb

终延伸

72℃

3min

1

保温

4℃

-

-

实验结果展示:

本试剂盒用大鼠/小鼠血液直接PCR后的电泳图(三对引物)

M:Marker

注意事项:

  1. 取新鲜血液放置过夜,效果会比新鲜的好。
  2. 每次制备的模板最好现用现做。
  3. 配制好的试剂C放-20℃保存。
  4. 若样品蛋白含量较高,可适当提高试剂C使用量,建议不要超过4ul/样品。
  5. 红细胞去除过程中,尽量将红细胞裂解彻底,如果模板最后呈红色,可能会影响PCR效果。
  6. 若样品为已经去除红细胞(全部为白细胞)血液样品,可直接进行步骤5及后续实验操作。