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组织直接PCR试剂盒

货    号 M02010
产品分类 分子生物学
规格与价格
同货号共 2 个规格,已合并到当前页面展示
规格 单位 价格(元) 操作
100T ¥980 询价
50T ¥620 询价
产品详情

组织直接PCR试剂盒说明书

货号: M02010

规格:50T/100T

保存:-20℃保存,有效期1年。

试剂盒内容:

产品名称

50T

100T

保存条件

试剂A

4mL

8mL

-20℃

试剂B

100μL

200μL

-20℃

dNTPs

100μL

200μL

-20℃

10×PCR Buffer

500μL

1000μL

-20℃

DNA聚合酶

60μL

120μL

-20℃

研磨棒

25个

50个

室温

产品简介:

动物组织直接PCR试剂盒可对不同动物组织进行PCR扩增。本裂解液既能使组织裂解充分,同时其成份又不影响PCR扩增,使裂解产物可直接作为PCR反应模板。一些样本比较容易裂解如脾和肾等,这些组织存在较少的PCR抑制剂,裂解后核酸完全释放。而对于一些不易裂解的组织如,心脏、肝脏、肺、尾巴等,本裂解液也能起到很好的裂解效果。动物组织中存在大量抑制PCR反应的物质,本试剂盒中DNA聚合酶具有很强的扩增性能,对于含有少量PCR抑制剂的粗提样本也能实现很好的扩增效果。

操作步骤:

  1. 取样:称取样品(新鲜样品,-20℃冷冻样品均可)于1.5mL EP管中。

取样标准:鼠组织、内脏(心、肝、脾、肺、肾)、耳朵称取5mg,鼠尾2-3mm。

  1. 研磨样品:在盛有组织的1.5mL EP管中加入59μL试剂A和1μL试剂B,混匀后用研磨杵充分捣碎动物组织。
  2. 裂解样品:55℃ 20min,95℃ 5min。
  3. 12000rpm,离心1min,上清即为PCR反应体系的DNA模板。

PCR反应体系:

PCR反应成分

25μL体系

DNA模板

2μL

Primer 1(10μM)

0.5μL

Primer 2(10μM)

0.5μL

DNA聚合酶

1μL

dNTPs

0.5μL

10×PCR Buffer

2.5μL

灭菌水

补足至25μL

PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5min

1

变性

94℃

15s

30

退火

56℃

30s

延伸

72℃

1min/kb

终延伸

72℃

3min

1

保温

4℃

-

-

实验结果展示:

本试剂盒用小鼠组织直接PCR后的电泳图(一对引物)

M:Marker

产品特色:

  1. 所需样本量极少。
  2. 无需高质量的模板就能进行PCR反应,节约时间和成本,适用性广等优点。

注意事项:

  1. 称取组织不要过量,过量导致裂解不完全,影响扩增效果。
  2. 研磨杵要尽可能的捣碎组织,否则会影响裂解效果。
  3. 每次制备的模板最好现用现做。
  4. 配制好的试剂C放-20℃保存。
  5. 若样品蛋白含量较高,可适当提高试剂C使用量,建议不要超过4uL/样品。
  6. 本产品同样适用于细胞样品PCR直接扩增,收取微量细胞即可。