核酸快速高灵敏度染色试剂盒说明书
货号: M02100
规格：25T
保存：RT，1年
产品说明（仅供参考）:
本产品仅用于科研，不可用于其他。
● 产品简介
核酸快速高灵敏度染色试剂盒(Fast and High Sensitivity Stain Kit for Nucleic Acids)是一种快速简单、可用于聚丙烯酰胺凝胶中的核酸检测的试剂盒。该方法检测灵敏度比 EB 高达 200 倍，能检测到10ng的 DNA条带，常用于检测 SSR 标记、SNP 标记等。
本试剂盒可足够用于25块常规的8×10cm凝胶的染色。
● 产品组成：
产品名称 | 规格 | 贮存 |
试剂A-增敏液（10×） | 250 ml | 常温 |
试剂B-加速液（10×） | 250 ml | 常温 |
试剂C-染色溶液(100×) | 26 ml | 常温，避光 |
试剂D-基本显色液(10×) | 250 ml | 常温 |
试剂E-显色加速液(500×) | 5 ml | 常温，避光 |
● 注意事项：
1. 由于染色非常灵敏，操作时请注意尽量使用高纯度的水，并确保所使用的器皿非常清洁，最好使用洁净的玻璃器皿。操作时必须戴手套，避免皮肤和凝胶直接接触。
2. 需自备无水乙醇及MilliQ级纯水。
3. 下述使用说明中各种溶液的使用量适用于大小为8×10cm厚度为0.75-1mm的凝胶。对于更大的凝胶，各种溶液的使用量需按凝胶面积的比例放大，对于更厚的凝胶，作用时间需按照厚度的比例适当延长。
4. 本说明书所指的常温温度为20-25℃，操作温度较低时由于溶液的扩散能力下降，各步骤需适当延长时间。
5. 基本显色液(10×)在低温环境下可能会出现沉淀，可在37℃水浴中溶解，并充分混匀后使用。
● 使用方法：
一. 漂洗步骤：
电泳结束后，凝胶中加入100 ml MilliQ级纯水，在摇床上常温摇动2分钟，摇动速度为60-70rpm；重复此步骤1次。
二. 染色步骤：
2.1 染色：
弃水，加入100 ml即用型染色液，在摇床上常温摇动5分钟，摇动速度为60-70 rpm。
即用型染色液配制量 100 ml | |
超纯水 | 79 ml |
试剂A-增敏液（10×） | 10 ml |
试剂B-加速液（10×） | 10 ml |
试剂C-染色溶液(100×) | 1 ml |
注：即用型染色液配制后需在20分钟内使用。
2.2 水洗涤：
弃原有溶液，加入100 ml MilliQ级纯水或双蒸水，在摇床上室温摇动15-20秒，摇动速度为60-70rpm。
注意：水洗涤的时间不能超过20秒。
三. 显色步骤：
弃水，加入100 ml显色液，在摇床上室温摇动3-10分钟，直至出现比较理想的预期核酸条带，摇动速度为60-70rpm。
显色液配制量 100 ml | |
超纯水 | 89.8 ml |
试剂D-基本显色液(10×) | 10 ml |
试剂E-显色加速液(500×) | 0.2 ml |
注：显色加速液(500×)有刺激性气味，建议在通风橱内操作；
显色液配制后需在20分钟内使用。
四. 终止步骤：
弃显色液，加入100 ml MilliQ级纯水，在摇床上常温摇动3-5分钟，摇动速度为60-70 rpm。
五. 保存：
可在MilliQ级纯水中保存；或采用适当的方式制备成干胶。
● 常见问题：
一. 背景太深：
1.1 显色时间过长。通常显色反应会在10分钟内结束，显色反应时间过长会导致背景很深。
1.2水的纯度太低。需使用大于16 MΩ·cm的高纯度水。
二. 核酸条带非常浅：
2.1 染色后水洗涤时间过长。在染色溶液染色后需严格控制水洗涤的时间，水洗涤的时间不能超过20秒，否则会导致过多的染色离子被洗去，导致检测灵敏度下降。
2.2显色加速液（500×）失效。显色加速液（500×）不能低温保存，低温保存会导致加速液失效。
三. 凝胶上出现小点或其它非核酸的痕迹：
3.1 凝胶没有充分被溶液浸没。请注意选择大小合适的容器，并加入足量的各种溶液，同时需保持适当的混匀速度确保凝胶可以被溶液浸没。
3.2 用于染色的容器没有充分洗涤干净。容器需先用洗涤剂充分洗涤，随后用自来水充分冲洗，最后用高纯度水再洗涤数次。该容器最好能专用于染色，并注意避免各种可能的污染。
3.3 指纹或其它压痕。请注意戴手套操作，切勿直接接触皮肤。操作时请注意尽量勿挤压、折叠或摩擦凝胶。
3.4 有金属物质接触凝胶。金属物质例如金属镊子等接触凝胶会出现非特异性痕迹。
注意事项：
1、我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
2、产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。