粪便RNA提取试剂盒

粪便RNA提取试剂盒说明书

货号: M03140

规格：50T/100T

保存：本试剂盒可常温运输,室温(10-30℃)保存，有效期为1年，消化液请于-20℃存放，避免反复冻融。

产品组成：

产品说明（仅供参考）:

该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

粪便RNA提取试剂盒是专门为从粪便中提取基因组RNA而设计，适用于不同来源的固态或液态粪便样本。本试剂盒采用了最新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方，提取得到的RNA纯度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染，可以直接应用于Northern杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、cDNA文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。

产品特点：

1. 提取RNA纯度高，无抑制剂，A₂₆₀/A₂₈₀为1.8-2.0。
2. 产率高，同样的样本量提取的RNA更多。
3. 操作简便快速，粪便预处理后，可在20分钟内完成操作。

自备试剂及耗材：

无水乙醇、异丙醇、PBS、1.5mL RNase-free灭菌离心管

使用说明（仅供参考）

1. 取出洗涤液B，按终浓度70%比例加入无水乙醇，如18mL加入42mL无水乙醇；36mL加入84mL无水乙醇，混匀后使用。
2. 取200mg的粪便于1.5mL RNase-free灭菌离心管中(若粪便样本为液态，取200μL于离心管中)，加入1mL PBS充分振荡混匀，300g离心5分钟，收集上清。取收集的上清液1mL于1.5mL RNase-free灭菌离心管中，12000rpm离心10分钟，弃0.8mL上清，振荡重悬剩余沉淀和液体。
3. 对于革兰氏阴性菌和一般的革兰氏阳性菌、肠道脱落细胞，直接进行步骤3操作；
4. 对于细菌壁较厚的革兰氏阳性菌、真菌、细菌芽孢等须首先进行破壁处理，可将上述沉淀用少许液氮反复研磨3次，再进行步骤3操作。
5. 加入200μL裂解液，20μL消化液，充分振荡混匀，65℃水浴10分钟。
6. 加入450μL异丙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。
7. 将吸附柱放入收集管内，将上述溶液全部转入吸附柱内，12000rpm 4℃离心1分钟，弃收集管内废液。
8. 将吸附柱放回收集管内，加500μL洗涤液B至吸附柱内，12000rpm 4℃离心1分钟，弃收集管内废液。
9. 将吸附柱放回收集管内，加500μL洗涤液B至吸附柱内，12000rpm 4℃离心1分钟，弃收集管内废液。
10. 按每份样本40μL取洗脱液（如10份提取样本，即取400μL洗脱液），放置于灭菌1.5mL离心管，65℃预热。
11. 将吸附柱放回收集管内，12,000rpm 4℃离心2分钟，离去残留的洗涤液。
12. 取出吸附柱，放入新的1.5mL RNase-free灭菌离心管内，在吸附柱中心加入40μL预热洗脱液，静置2分钟，12000rpm 4℃离心1分钟，收集RNA溶液。提取的RNA即可用于下一步实验或-70℃保存。

注意事项：

1. 裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。
2. 洗涤液B含有高效去污因子，最好现用现配。
3. 为防RNA酶污染，实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩，使用处理过的无RNA酶的容器和无RNA酶的超纯水。
4. 提取的RNA如暂不使用，应-70℃保存。可适当加入RNA保护因子。
5. 产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
6. 期货、-80℃保存、抗体、重组蛋白、效期较短(六个月以内)等特殊产品，一经订购，若无质量问题，恕不予退换！