血清血浆 miRNA 提取试剂盒
货号:M03260
规格：25/100T
保存：RT ，2 年
产品说明：
血清血浆 miRNA 提取试剂盒操作步骤简单、重复性好、小 RNA 产率高。使用该试剂盒通过 一步上柱即可获得高纯度 miRNA，可在 10min 左右完成小 RNA 的提取；且使用该试剂盒提取的小 RNA (Small RNA) 中， 长度在 15~200nt 范围的 RNA 在 95%以上， 基本不含有大 RNA 和 DNA， 可直接用于后续的反转录、 Northern 杂交、测序等应用。
产品组份：
组分 | 25T | 100T |
Serum/Plasma miRNA Reagent | 20 mL | 80mL |
miRNA 吸附柱 | 25 套 | 100 套 |
RnaseFree H2O | 5mL | 5mL |
使用方法：
自备试剂：异丙醇、乙醇、 75%异丙醇
1. 向 1.5mL EP 管中加入 800 µL Serum/Plasma miRNA Reagent。将 300 µL 血清或血浆样本加入到 上述 800 µL miRNA Reagent A 中，手动混匀 30 s，室温放置 5min。
2. 13000 rpm 离心5 min，将上清约 1 mL 倒入到新的 2 mL EP 管中。加入 1 mL 异丙醇， 上下颠倒 混合均匀。
3. 将上述溶液分三次倒入到吸附柱中(每次约 700µL)， 13000 rpm 离心 15s ，倒掉过柱液。
4. 向吸附柱中加入 700 µL 75%异丙醇洗涤一次， 13000 rpm 离心 15s ，倒掉过滤液。
5. 向吸附柱中加入 500 µL 无水乙醇洗涤一次， 13000 rpm 离心 15s ，倒掉过滤液。
6. 吸附柱 13000 rpm 空离心 2min，去掉残留的乙醇。
7. 将吸附柱放入到新 1.5 mL EP 管中，室温放置 2 min，使残留乙醇挥发。在吸附柱滤芯上加入 30 µL RnaseFree H2O，室温静置 2 min ，13000 rpm 离 2 min，洗脱产物即为提取的 miRNA。
常见问题汇总：
1. 由于血清血浆中的 miRNA 含量极低，提取的 miRNA 浓度通常在 5ng/µL 以下，因此难以用常 规的NanoDrop 测量浓度，建议直接使用10 µL 进行下游反转录。由于本试剂盒提取的是小 RNA， 该浓度下的 miRNA Copy 数足以进行下游检测。
2. 由于血清血浆中 miRNA 的含量低， 为了获得更可靠的实验数据， 建议使用特异性和灵敏度更好 的 TaqMan 探针法进行 miRNA 的下游检测。本试剂盒提取的 miRNA 并不限于其它检测方法和 用途，包括 SYBR Green 法检测、二代测序、芯片等检测领域。
注意事项：
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普 通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。