柱式超纯快速植物RNA小提试剂盒

柱式超纯快速植物 RNA 小提试剂盒

货号 ：M03340

规格 ：50T

保存 ：RT，其中 RNase-free DNase 于 4℃保存， 12 个月。

产品说明 ：

本产品采用了独特的裂解系统，无需使用β-巯基乙醇、苯酚、氯仿等有毒试剂，适合各种简单 植物组织材料(如叶片、茎、幼 苗等) 的 RNA 提取， 操作快速， 可有效提取分子量大于 200 nt 的 RNA。利用该试剂盒提取的植物 RNA 纯度高，极少含蛋白质、 基因组 DNA 和其它杂质的污染； 可直接用于 RT-PCR、Northern blot 、Real Time PCR、构建 cDNA 文库等各种下游实验。

产品组份 ：

实验准备 ：

1. RNase-free DNase 母液的配制：用 1 mL RNase-free 注射器抽取 550 µL RNase-free ddH2O ， 打进装有 RNasefree DNase (2000 U)干粉的玻璃瓶中，轻柔混匀，分装后-20℃保存(可保存 9 个 月)。

注：从-20℃ 融化后的 RNase-free DNase 母液保存于 4℃(可保存 6 周)，不要再次冻存。

2. 使用前请先在漂洗液 2 (WB2)中按瓶标加入无水乙醇，并做好标记。

操作步骤 ：

1．取 450 µL 裂解液加入到 1.5 mL RNase-free 离心管中。

2．组织样品经液氮研磨后， 将研磨成粉末状的样品(50- 100 mg) 加入到上述含有 450 µL 裂解 液的 1.5 mL 离心管中，涡旋剧烈震荡混匀直至裂解液中无明显沉淀。

注 ：在 60℃孵育 1-3 min 将有助于植物组织裂解， 但是对于某些富含淀粉的样品， 请不要加热 处理，防止因淀粉引起的样品膨胀。

3．将过滤柱放入收集管中，然后将步骤 2 中所有的溶液用移液器转移至过滤柱中， 12000 rpm 离心 5 min，小心吸取收集管中的滤液至新的 1.5 mL RNase-free 离心管中，吸头尽量避免触及收集 管中的细胞碎片沉淀。

注 ：由于裂解液较粘稠，所以将溶液转移至过滤柱时，可以剪去部分吸头末端

4．缓慢加入 0.5 倍滤液体积的无水乙醇， 上下颠倒混匀(此时可能会出现沉淀) ，将得到的溶 液和沉淀一起转入离心吸附柱(吸附柱放在收集管中)， 12000 rpm 离心 30 s，弃除收集管中的废 液，将吸附柱放回收集管中。

5．向吸附柱中加入 350 µL 漂洗液 1 (WB1) ，12000 rpm 离心 30 s，弃除收集管中的废液， 将 吸附柱放回收集管中。

6 ．RNase-free DNase 工作液的配制：取 10 µL RNase-free DNase 母液放入新的 RNase-free 离心 管中，加入 70 µL 膜反应液，轻柔混匀。

注 ：解冻后的 RNase-free DNase 母液保存于 4 ℃(可保存 6 周)，避免反复冻融。

7．向吸附柱中央加入 80 µL RNase-free DNase 工作液，室温放置 15 min。

8．向吸附柱中加入 350 µL 漂洗液 1 (WB1) ，12000 rpm 离心 30 s，弃除收集管中的废液， 将 吸附柱放回收集管中。

9．向吸附柱中加入 500 µL 漂洗液 2 (WB2) (使用前请先检查是否已加入无水乙醇) ，12000 rpm 离心 30 s ，弃除收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。

10．重复操作步骤 9 一次。

11 ．将吸附柱放回收集管中， 12000 rpm 离心3 min，此步骤十分重要， 否则残留的乙醇(漂洗 液 2 (WB2)中的成分)会影响 RNA 的使用。

12．将吸附柱放入一个新的 1.5 mL RNase-free 离心管中， 加入 50- 100 µL RNase-free ddH2O，室 温放置 1-2 min ，12000 rpm 离心 1 min，得到 RNA 溶液。所得 RNA 溶液应立即使用或适量分装后 存放于-80℃待用。

注意事项 ：

1． 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放 于普通住宅区。

2． 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。