产品详情
磁珠法提细菌RNA试剂盒说明书
货号：M03370
规格： 50T/ 100T
保存：2-8℃(注:溶酶体 以附件形式，-20℃保存;磁珠，4℃保存，请勿冷冻）
试剂盒组成：
组分 | 50T | 100 T |
裂解液 | 20 mL | 40 mL |
漂洗液 | 10 mL | 10 mL×2 |
洗脱液 | 6 mL | 12 mL |
溶菌酶 | 3 mL | 6 mL |
溶菌酶缓冲液 | 10 mL | 20 mL |
磁珠 | 1 mL×1 | 1 mL×2 |
EP管 | 100 | 200 |
产品简介：
磁珠法提细菌RNA剂盒，使细菌在裂解液(不含Trizol，氯仿等有毒试剂)中裂解完全后，在结合液的作用下，使RNA与磁珠特异性地识别和高效的结合，经漂洗洗脱后，在外加磁场力的作用下能从样品中分离出RNA，无需添加 DNaseI酶就能获得干净的RNA条带。提取的基因组RNA纯度高A260/A280比率介于2.0-2.1之间，基本没有DNA和蛋白质污染，可以应用到各类分子生物学下游实验，适用于革兰氏阴性菌。
产品特点：
磁珠法提取细菌RNA具有传统柱式法无法比拟的优势。与柱式法相比大大缩短了实验时间,15-20分钟就可提取到条带清晰，浓度高的RNA。具有操作简单，用时短，安全无毒，可完成自动化提取等优势。
操作步骤 (仅供参考) ：
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。(每瓶需要单独加入 30mL 无水乙醇)
- 于 1.5mL EP 管中加入用LB 培养过夜的新鲜菌液 1mL，12000rpm 离心1min，尽量吸除上清。
- 向菌体中加入200μL 溶菌酶缓冲液，50μL溶菌酶溶液，移液枪吹吸混匀，室温静置5min。
- 加入350μL裂解液，移液枪吹吸混匀，室温静置 2min。
- 加入600μL无水乙醇，用移液枪吹吸混匀。
- 加入20μL磁珠，涡旋震荡混匀，室温静置5min。将EP管置于磁力架中进行磁分离，待磁珠完全吸附于磁力架后，去除上清，沿管壁尽量将液体吸除干净，注意不要吸到磁珠。
- 加入600μL的漂洗液(使用前请检査是否已加入乙醇)，用涡旋振荡器震荡混匀。将离心管放置于磁力架中，待磁珠完全吸附于磁力架后，去除上清，沿管壁尽量将液体吸除干净，注意不要吸到磁珠。
- 重复第6步操作。
- 打开离心管的盖子,于室温中静置干燥1min，注意干燥时间不能太久,会使得磁珠上的RNA不易被洗脱。
- 加洗脱液 40-100μL，涡旋混匀，室温静置5min，将离心管置于磁力架中，待磁珠完全吸附于磁力架后，用移液枪沿管壁将溶液吸到新的离心管(RNA专用无酶无菌EP管)中，注意不要吸到磁珠，所得溶液即为纯化后的RNA样品，放于-20℃保存。
注意事项：
- 磁珠使用前用涡旋震荡器震荡混匀。
- 磁珠置于 4℃冰箱保存。
- 冷冻，干燥和离心等操作会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并影响磁珠表面功能基团的化学活性。
- 样品应避免反复冻融，否则会导致提取量下降。