柱式植物基因组DNA提取试剂盒 (带附件:RNase A 1m1×1支 )

植物基因组DNA提取试剂盒说明书

货号：M03550

规格：50T/ 100T

保存：室温(15℃-25℃) 干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长，酶请放于-20℃

试剂盒内容：

产品简介：

本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统提取植物的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，能够高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的植物基因组DNA可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

操作步骤：

使用前先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1. 植物组织预处理：取新鲜植物组织（不超过100mg）或干重组织（不超过20mg），于液氮中充分研磨至细粉状，让液氮自然挥发。
2. 将研磨好的植物组织粉末迅速转移到预先装有400μL溶液A、20μL RNase A（10mg/mL）和5μL β-巯基乙醇的离心管中，充分颠倒混匀，室温放置10min。
3. 加入140μL溶液B，充分颠倒混匀，12000rpm离心10min，将上清转移至新离心管中(约400-500μL)，注意不要吸入沉淀。
4. 加入和上清相同体积的溶液C，充分颠倒混匀，再加入和溶液C相同体积的无水乙醇，此时若出现絮状物，将絮状物吹散后一起加入吸附柱中，12000rpm离心5min，弃废液，一次加不完可分两次加入。

注意：如果吸附柱膜呈绿色或离心时有堵塞现象，可向吸附柱中加入600μL无水乙醇，并适当延长离心时间。

1. 向吸附柱中加入600μL漂洗液(请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放回收集管。
2. 向吸附柱中加入600μL漂洗液，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放回收集管中， 12000rpm离心2min。
3. 将吸附柱置于室温或50℃温箱放置数分钟，否则残余的乙醇可能会影响后续的实验如酶切、PCR等。
4. 将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50-200μL经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置1-5min，12000rpm离心2min，即可得到高质量的植物基因组DNA。
5. (可选)离心所得洗脱液再加入吸附柱中，室温放置2min，12000rpm离心2min。

注意事项：

1. 组织应尽量选取新鲜幼嫩样本，富含多糖多酚的组织可能会提取失败，请选用多糖多酚专用试剂盒。
2. 如果试剂盒中的试剂出现沉淀，可在65℃水浴中融化，不影响使用。
3. 洗脱缓冲液的体积不能小于50μL，DNA产物应-20℃保存。