产品详情
多糖多酚植物DNA提取试剂盒说明书
货号:M03560
规格:50T/ 100T
保存:室温(15℃-25℃) 干燥保存,复检期12个月,2℃-8℃保存时间更长,RNase A请放于-20℃。
试剂盒内容:
10T | 50T | 100T | Storage | |
RNase A | 200ul | 1mL | 1mL×2 | -20℃ |
巯基还原剂 | 150ul | 600μL | 1.5mL | 2-8℃ |
裂解液溶液A | 6ml | 30mL | 60mL | RT |
去蛋白液溶液B | 2ml | 10mL | 20mL | RT |
抽提液溶液C | 2ml | 10mL | 20mL | RT |
沉淀液溶液D | 5ml | 25mL | 50mL | RT |
漂洗液溶液E | 5ml | 25mL | 50mL | RT |
TE缓冲液 | 1ml | 3mL | 6mL | RT |
产品简介:
本试剂盒适用于从富含多糖多酚的植物组织中提取DNA。使用本试剂盒提取的植物基因组DNA可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、等实验。
操作步骤:
- 植物组织预处理:取新鲜植物组织(不超过100mg)或干重组织(不超过20mg),于液氮中充分研磨至细粉状,让液氮自然挥发。
若无液氮,也可将组织剪碎直接加入600μL裂解液溶液A(预先加入20μL RNase A(10mg/mL)和12μL 巯基还原剂)进行研磨,研磨后65℃孵育20min。
- 将研磨好的植物组织粉末迅速转移到预先装有600μL裂解液溶液A、20μL RNase A(10mg/mL)和12μL 巯基还原剂的离心管中,充分颠倒混匀,65℃孵育20min。
- 12000rpm离心10min,吸取400μL上清转移至新的离心管。加入200μL去蛋白液溶液B,充分混匀后静置5min(建议冰上放置)。
- 12000rpm离心5min,将上清转移至新离心管中,加入200μL抽提液溶液C(见注意事项3),充分震荡混匀20秒。
- 12000rpm离心5min,此时溶液分为两层,小心吸取上层转移至新的离心管,加入500μL沉淀液溶液D(见注意事项3),充分颠倒混匀,静置2min。
- 12000rpm离心5min,小心吸取上清,加入2倍体积预冷的无水乙醇,轻柔混匀,静置5min。
- 12000rpm离心5min,小心去掉上清,加入500μL漂洗液溶液E,震荡清洗沉淀。
- 12000rpm离心5min,去上清,再次离心片刻,将管壁上的残余漂洗液离心至管底,用10μL移液器小心吸走残余液体,加入50μL TE缓冲液溶解沉淀,-20℃保存即可。
注意事项:
- 本试剂盒适用于富含多糖多酚的组织。
- 如果试剂盒中的试剂出现沉淀,可在65℃水浴中融化,不影响使用。
- 抽提液溶液C、沉淀液溶液D有一定的腐蚀性,请戴手套小心操作。
- 提取完的DNA样本如不能及时进行后续操作,最好置于-80℃保存.
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。