产品详情
多糖多酚植物基因组提取试剂盒说明书
货号: M03570
规格：50T
保存：RT，有效期1年（RNase A以附件形式发货，-20℃保存）。
产品组成：
产品名称 | 50T | 保存条件 |
RNase A | 100μL×2 | -20℃保存 |
溶液A | 25mL | RT保存 |
溶液B | 12.5mL | RT保存 |
去蛋白液 | 18mL | RT保存 |
漂洗液 | 15mL | RT保存 |
洗脱液 | 15mL | |
过滤柱 | 50个 | |
吸附柱 | 50个 | |
收集管 | 50个 |
注意：
- 使用前先在漂洗液和去蛋白液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签（去蛋白液每瓶需要单独加入12mL无水乙醇，漂洗液每瓶需要单独加入45mL无水乙醇）。
- 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
产品说明（仅供参考）:
该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
本试剂盒采用特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲系统，能从多种植物组织中分离纯化高质量基因组DNA，独特的沉淀溶液可以沉淀去除多糖多酚植物样本中的蛋白质、多糖以及酚类等杂质。提取的基因组DNA纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒纯化的基因组DNA适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交、芯片检测、高通量测序等实验。
操作步骤（仅供参考）
- 植物组织预处理：取新鲜植物组织，去掉叶脉后加入液氮充分研磨，称取植物新鲜组织约200mg或干重组织约40mg。
- 将研磨好的植物组织粉末迅速转移到预先装有500μL溶液A、4μLRNaseA的离心管中，充分颠倒混匀，65℃水浴20min，水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
【注】若裂解后溶液粘稠，可以适量加大溶液A使用量，同时在步骤3中增加缓冲液B的使用量。
- 加入250μL溶液B（溶液B用前摇匀），充分颠倒混匀，涡旋振荡1min，12000rpm离心5min，转移上清至过滤柱中（过滤柱放在收集管中），然后12000rpm离心1min，转移滤液至新的离心管中（约600-700μL）。
- 加入和上清相同体积的的无水乙醇，此时若出现絮状物，将絮状物吹散后一起加入吸附柱中，12000rpm离心5min，弃废液，一次加不完可分两次加入。
【注】如果吸附柱膜呈绿色或离心时有堵塞现象，可向吸附柱中加入600μL无水乙醇，并适当延长离心时间。
- 向吸附柱中加入550μL去蛋白液（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm离心1min，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
- 向吸附柱中加入700μL漂洗液（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm离心1min，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
- 重复步骤6。
- 将吸附柱放回收集管中，12000rpm离心2min，弃收集管，然后将吸附柱转移到新的离心管中，室温晾干5-10min。
【注】乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间，以免难以洗脱DNA。
- 在吸附柱中加入50-200μL洗脱缓冲液，室温放置3-5min，12000rpm离心2min，将溶液收集到离心管中。
- （可选）离心所得洗脱液再加入吸附柱中，室温放置2min，12000rpm离心2min。
注意事项：
- 组织应尽量选取新鲜幼嫩样本，避免样品反复冻融，否则影响DNA提取效率和质量。
- 如果试剂盒中的试剂出现沉淀，可在65℃水浴中融化，不影响使用。
- 洗脱缓冲液的体积不能小于50μL，DNA产物应-20℃保存。
- 植物组织的研磨程度影响DNA提取效率，所以组织一定要用液氮研磨充分。