粪便基因组DNA提取试剂盒 (带附件:RNase A 1m1×1支 蛋白酶K 1m1×1支 )

粪便基因组DNA提取试剂盒

货号：M03620

规格：50T/ 100T

保存：室温(15℃-25℃) 干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。

注：试剂盒开封后溶液SA、SB、SC需在2-8℃保存。

产品简介：

本试剂盒适合于从各种粪便中提取微生物DNA。对粪便中各种细菌、真菌有很好裂解效果，最大限度的保留了微生物DNA的多态性。

使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好，可直接用于各种常规操作，包括酶切、PCR 、文库构建、Southern 杂交等实验。

操作步骤： 使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1. 称取粪便样本 50-200mg，加入 400μL-800μL 溶液 SA，冰上放置 10min，12000g 离心 1min。
2. 弃上清，沉淀中加入 400μL 溶液 SB，20μL 10mg/ml RNA酶A ，20μL 10mg/ml 蛋白酶 k，涡旋 30s，65℃水浴 30-60min，期间颠倒数次，12000g 离心 2min。
3. 取上清于 1.5mL 离心管中，加入300-600μL 溶液 SC，12000g，离心1-2min，取上清。
4. 吸取上清至 DNA 吸附柱中，室温静置 1-2min，12000g 离心0.5-1min（可重复一次）。
5. 倒掉收集管中的废液，在吸附柱中加入漂洗液 500ul，12000 rpm 离心 1min。（重复一次）
6. 倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管，12000 rpm 离心 0.5-1min。
7. 拿出吸附柱在室温干燥数分钟( 因季节及气候等因素不等)。
8. 将吸附柱放入一个新的离心管中，加入 50-100ul 洗脱液(65℃预热)，12000 rpm 离心 1min。
9. 将离心管中的液体重新加入到吸附柱中，12000 rpm 离心 1min。离心管中即为粪便微生物 DNA 溶液。

注意事项:

1、新鲜的粪便样本会得到更高的产率，不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。

2、若溶液中出现浑浊可在37℃水浴中溶解片刻至清澈，不会影响结果。

3、在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀，否则会堵塞吸附柱，并影响产物纯度。

4、洗脱缓冲液的体积最好不少于50uL，体积过小会影响回收效率；建议使用试剂盒附带的洗脱缓冲液，用水洗脱也会损失部分产物；DNA应保存在-20℃避免反复冻融，以防降解。

5、液体试剂避免接触皮肤，若意外接触应立即使用大量清水冲洗。