宿主DNA去除试剂盒

宿主DNA去除试剂盒说明书

货号: M03900

规格：50T

英文名称：Host DNA Depletion Kit

保存：-20℃，1年

产品组成：

产品说明（仅供参考）:

该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

本试剂盒适用于从生物液体样本 (肺泡灌洗液、血清血浆、液化痰液、胸腹水、脑脊液、拭子等)中差异性裂解人源细胞，并去除人源核酸。试剂盒中的Buffer GB2选择性地将宿主细胞裂解，释放的宿主核酸被核酸酶迅速降解，而细菌、真菌等微生物在此过程中几乎无损失。该产品可与硅胶膜离心柱法和磁珠法核酸提取试剂盒搭配使用;在显著降低宿主背景的同时，将样品中的微生物核酸进行特异性富集，从而大大提高了PCR或实时PCR分析病原体的灵敏度和特异性性，大幅度提升mNGS检测的准确度和灵敏度，具有良好的应用前景。

实验前准备及重要注意事项

1. 使用前在室温或2~8°C下解冻Buffer GB2，并充分混匀。解冻后的Buffer GB2可以于2~8°C放置1~2周而不影响其活性，长期保存应于-20℃。为了确保最佳性能，冻融不要超过3次。如果一次提取需要的Buffer GB2 不足一瓶，请确保在超净工作台等无菌条件下使用，并避免剩余缓冲液中微生物的污染和生长。
2. 为避免由于污染造成的错误结果，请保持工作区域清洁和穿防护服，并合理设置对照品进行质控。采用适当措施处理样品材料，降低交叉污染的风险，试剂使用完后立即盖好瓶盖，防止污染。

操作步骤

1.取前期处理好的样本，10000 rpm室温离心5~10 min，小心弃除上清

注意:不要扰动下层细胞沉淀，以免造成样本损失

2.加入500 µL Buffer GB2，涡旋混匀，室温，600 rpm孵育10 min。

3.12000 rpm离心2 min，小心去除上清。

注意:去除上清时不要扰动菌体沉淀，以免造成样本损失

4.向沉淀中加入200 µL Buffer GB2及1 µL Benzonase，37℃,600 rpm孵育20 min。

加入20 µL Proteinase K，涡旋混匀，56℃孵育10 min。反应完成后瞬时离心立即

5.进行后续微生物核酸提取，以免影响提取产量。