货号:M03950
规格:10T/20T
保存:本试剂盒可常温运输,室温(10-30℃)保存,有效期为12个月,消化液、DNA Carrier请于-20℃存放,避免反复冻融。
试剂盒组成:
组分 | 10 T | 20 T |
吸附柱和收集管 | 各10个 | 各20个 |
裂解液 | 17mL | 34mL |
洗涤液A | 31.5mL | 63mL |
洗涤液B | 13.5mL | 27mL |
洗脱液 | 1mL | 2mL |
消化液 | 1.7mL | 3.4mL |
DNA Carrier | 0.35mL | 0.7mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
产品简介:
血清血浆游离DNA提取试剂盒是专门用于提取中量(0.5-1.5mL)血清、血浆、胸腹水、脑脊液、滑膜液、水样等液体样本中游离 DNA 的试剂盒。本试剂盒采用了最新的优质进口离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,能高效地分离DNA。提取得到的 DNA 较其它品牌的同类试剂盒产量更大,纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。
产品特点:
- 提取DNA纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.7-1.9。
- 产量更高,较国内同类产品高出20%。
- 可用于中量(0.5-1.5mL)血清、血浆、胸腹水、脑脊液、滑膜液、水样等液体样本中DNA的提取。
- 操作简便快速,可在半小时内获得理想的 DNA。
- 不含苯酚和氯仿等有毒溶剂,安全无毒。
操作步骤(仅供参考):
1. 请自行准备:无水乙醇、15mL离心管。
2. 取出洗涤液,按以下操作:
(1) 洗涤液A:31.5mL加入13.5mL无水乙醇,混匀;63mL加入27mL无水乙醇,混匀。
(2) 洗涤液B:13.5mL加入31.5mL无水乙醇,混匀;27mL加入63mL无水乙醇,混匀。
(3) 配制好的析出液及洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。
3. 取15mL 离心管(自备),加入 1500μL 样本,30μL DNA Carrier 混合均匀,加入 1500μL 裂解液及 150μL 消化液,振荡混匀,56℃水浴 10 分钟。
4. 加入 6000μL 无水乙醇,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响 DNA 的提取与后续实验。
5. 将吸附柱放入收集管内,将 4590μL 上述溶液转入吸附柱内,静置 2 分钟,8,000 rpm 离心 2 分钟,弃收集管内废液;
6. 将吸附柱放回收集管内,将剩余4590μL溶液转移至吸附柱内,重复步骤 5。
7. 将吸附柱放回收集管内,加3750μL洗涤液A至吸附柱内,8,000 rpm离心2分钟,弃收集管内废液。
8. 将吸附柱放回收集管内,加3750μL洗涤液B至吸附柱内,静置2分钟,8,000 rpm离心1分钟,弃收集管内废液。
9. 将吸附柱放回收集管内,8,000 rpm 离心2分钟,离去残留的洗涤液。
10. 取出吸附柱,放入新的15mL收集管内,加入70μL洗脱液(注意将洗脱液均匀加在吸附膜的中间和四周),静置3分钟,8,000 rpm离心3分钟,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。
建议样本量和加入试剂盒试剂组分比例:
样本量 | DNA Carrier | 消化液 | 裂解液 | 无水乙醇 | 洗涤液 A | 洗涤液 B |
1ml | 20ul | 100ul | 1ml | 4ml | 2.5ml | 2.5ml |
1.5ml | 30ul | 150ul | 1.5ml | 6ml | 3750ul | 3750ul |
注意事项:
1、裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。
2、裂解液如有白色絮状物析出属正常现象,置于 37℃水浴中溶解即可。