产品详情
DNA产物纯化试剂盒说明书
货号：M03960
规格：50T/100T/200T
保存：常温干燥保存，复检期为一年。
试剂盒组成：
名称 | 100T | 200T | |
结合液 | 30ml | 60ml | 60ml×2 |
漂洗液 | 15ml | 15ml×2 | 15ml×4 |
洗脱液 | 15ml | 30ml | 60ml |
吸附柱 | 50个 | 200个 | |
收集管 | 50个 | 100个 | 200个 |
说明书 | 1份 | 1份 | 1份 |
产品说明：
本试剂盒采用独特的离心吸附柱纯化酶切、PCR等反应液中的DNA片段，同时除去蛋白质、其他有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒可回收100bp-40kb大小的DNA片段，回收率可达80%以上（小于100bp和大于10kb的DNA片段回收率为30-50%）。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等试验。
注意事项：在使用本试剂盒前请阅读此注意事项。
1. 本试剂盒适用于无选择性地回收溶液中所有DNA片段（可去除50bp以下的小片段），如需选择性地回收特定片段，同时去除其他不同大小片段，请选择琼脂糖凝胶回收试剂盒。
2. 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越小，回收率越低。
3. 回收小于100bp和大于10kb的DNA片段时，可适当延长吸附和洗脱的时间。
操作步骤：（使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。）
- 估测PCR反应液或酶切反应液的体积，向其中加入4倍体积的结合液，充分混匀。如PCR反应体系为100μl,则加入400μl结合液。
- 将上一步所得溶液加入一个吸附柱中（吸附柱放入收集管中），室温放置2分钟，12000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放入收集管中。注意：吸附柱最大容积为800μl，若样品体积大于800μl可分批加入。
- 向吸附柱中加入600μl漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心30-60秒，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
- 向吸附柱中加入600μl漂洗液，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
- 12000rpm离心2min，尽量除去漂洗液。将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，防止漂洗液中的乙醇影响后续的实验。
- 将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加30-100μl经65-70℃水浴预热的洗脱液，室温放置2min，12000rpm离心2min，收集DNA溶液。
注意：
- 为了增加回收效率，可将得到的收集液重新加入吸附柱中，12000rpm再次离心2min。
- 洗脱缓冲液体积不应少于30μl，体积过小影响回收效率。
- 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5之间。
- DNA产物-20℃保存。