产品详情
DNA琼脂糖凝胶回收试剂盒(磁珠法)说明书
货号: M03980
规格:50T/100T
保存:2-8℃保存,有效期1年。
产品组成:
名称 | 50T | 100T | 保存条件 |
试剂Ⅰ | 40mL | 80mL | RT |
漂洗液 | 7.5mL | 15mL | RT |
洗脱液 | 3mL | 6mL | RT |
磁珠 | 1mL | 2mL | 2-8℃,切勿冷冻 |
产品说明(仅供参考):
该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
磁珠法凝胶回收试剂盒,使磁珠在含有DNA的琼脂糖溶胶液中与DNA分子特异性地识别和高效的结合,在外加磁场力的作用下能从样品中分离出DNA。
磁珠法具有传统柱式法无法比拟的优势。彻底摆脱用柱式法提取DNA过程中反复离心等手工操作流程,具有操作简单,用时短,安全,可完成自动化提取等优势。
使用说明(仅供参考)
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签(如50T需要单独加入22.5mL无水乙醇,100T需要单独加入45mL无水乙醇)。
- 将切好的胶称重放入离心管中,加入试剂Ⅰ,试剂Ⅰ的量参考下表(例,若需要切胶回收的片段大小1000bp,100mg的胶加50μL试剂Ⅰ)。
回收片段范围(bp) | 胶重与试剂Ⅰ体积比 |
≥5000bp | 1:1 |
≤500bp | 1:2 |
500bp﹤片段﹤5000bp | 2:1 |
- 将上述离心管放入60℃-70℃水浴锅中加热约10min直到胶完全溶解,期间可将离心管从水浴锅中取出,颠倒混匀2-3次,有利于凝胶溶解。
- 凝胶溶解后,将离心管从水浴锅中取出,待离心管放置室温后,加入80μL异丙醇(需自备),用移液枪轻轻吹吸混匀,加入20μL磁珠,用移液枪吹吸混匀,室温放置10min,期间颠倒混匀3-5次(或置于混匀仪上混匀),将离心管放置于磁力架中,待磁珠完全吸附,溶液变澄清后,用移液枪沿管壁吸出残液,注意不要吸到磁珠。
- 加入500μL的漂洗液(加无水乙醇后使用),用涡旋振荡器震荡混匀。将离心管放置于磁力架中,待磁珠完全吸附于磁力架后,用移液枪沿管壁吸出残液,注意不要吸到磁珠。
- 将离心管置于磁力架上打开离心管的盖子,于室温中静置干燥5min,观察离心管壁和底部液体挥发完全且磁珠表面呈光滑的亮面即可,注意干燥时间不能太久,会使得磁珠不易被洗脱(期间若观察到离心管底部有残留的漂洗液,用移液枪吸弃残留的漂洗液,不要吸到磁珠)。
- 取下磁力架上的离心管,加洗脱液30-50μL,涡旋振荡器混匀或用移液枪吹吸混匀,室温放置10min后,将离心管置于磁力架中,待磁珠完全吸附于磁力架后,用移液枪沿管壁将溶液吸到新的离心管中,注意不要吸到磁珠,所得溶液即为纯化后的DNA样品,放于-20℃保存。
注意事项:
- 磁珠使用前用涡旋震荡器震荡混匀。
- 磁珠置于4℃冰箱保存。
- 冷冻,干燥和离心等操作会引起磁珠团聚,不易于重悬和分散,并影响磁珠表面功能基团的化学活性。