产品详情
DNaseⅠ(RNase Free)说明书
货号: M04160
规格：1000U
保存：-20℃，有效期1年。
产品组成：
Component | 1000U |
DNaseⅠ（RNase Free）,1 U/µl | 1mL |
Reaction Buffer（with MgCl2）,10× | 1mL |
200 mM EDTA | 1mL |
产品说明（仅供参考）:
该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
DNase I是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶，可用于降解单链或双链DNA。其原理为DNase I水解磷酸二酯键产生带有5'-磷酸基团和3'-OH的单核苷酸或寡核苷酸。Mg2+或Mn2+都可以激活DNase I的活性，而Ca2+浓度直接影响酶的活性。Mg2+存在时可在双链DNA的每条单链上随机地产生切口；而在Mn2+存在下可使双链DNA断裂，使DNA片段化。用于无DNA污染的RNA的制备，逆转录及体外转录等实验。
使用说明（仅供参考）
- 以制备用于RT-PCR的RNA样品为例，配置10µl反应体系，如下表：
组分 | 体积 | 终浓度 |
RNA | X μL | 1 μg |
Reaction Buffer（with MgCl2）,10× | 1 μL | 1× |
DNaseⅠ（RNase Free） | 1 μL | 1U |
RNase Free Water | Y μL | 补足至10 μL |
- 37℃孵育30分钟。
- 加入1µl 200 mM EDTA，65℃孵育10分钟，使DNase Ⅰ失活，终止反应。
- 处理后的RNA可用于RT-PCR。
注意事项：
- 因为DNase I经常用于需要保持RNA完整性的DNA消化实验，所以在酶制备过程中最大限度的避免了RNase污染，可以安全地用于RNA的提取，但由于该酶中不含RNase抑制剂，使用时需注意防止外源RNase的污染。
- DNase I受剪切力的影响比较大，使用前可以将离心管上下颠倒混匀，避免涡旋震荡。
- 每处理1μg RNA，DNase I用量不要超过1U。
- 产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。