10000*Gel Red 核酸染料(国产)说明书
货号: M05010
规格: 0.5mL
保存条件: 4℃,密封避光,有效期3年
产品说明:
本产品仅用于科研,不可用于其他。
Gel Red是一种高灵敏、无毒超安全和超稳定的荧光核酸凝胶染色试剂(在工作浓度中)。它可以替代高毒性染色剂-溴化乙锭(EB),用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中dsDNA和ssDNA的染色。Gel Red的灵敏度远高于EB,并且不需要脱色。由于Gel Red和EB有相同的光谱特性,因此用它替代EB时不需要更换成像系统。
Gel Red既可用于预制凝胶也可用于电泳后染色。通常电泳后染色的灵敏度更高,并能排除染料对DNA迁移的干扰。使用Gel Red进行电泳后染色,操作简单不需要脱色和特殊溶液。只要将染料稀释在0.1M NaCl中,并将凝胶置于染色液中,30分钟后就可以观察。染色液在室温下极为稳定,可以多次反复使用。相比而言,预制凝胶由于不需要额外染色过程,因此染料用量更少,更为简单经济。
使用说明(仅供参考):
- 胶染法:(用法同EB)(推荐方法)
- 制胶时加入Gel Red核酸染料(例如:每50mL琼脂糖溶液中加入5μL Gel Red 10,000×储液,以此比例类推)。
- 按照常规方法进行电泳。
注:
- 此方法染色染料用量相对较少。500μL染料大约可以做100块50mL的胶。
- 由于Gel Red具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将Gel Red储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。Gel Red兼容几乎所有常用的电泳缓冲溶液。
- 如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关。请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
- 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
- 泡染法:(用于胶回收等高浓度DNA样品推荐使用泡染法)
- 按照常规方法进行电泳。
- 用H2O将Gel Red 10,000×储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中,制成3×染色液。(例如将15μL Gel Red 10,000×储液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
- 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同(如需缩短泡染时间,可将染色液预先加热至70℃左右,然后放入凝胶,孵育10 min即可获得理想效果)。对于含3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。
注:
- 用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
- 3×Gel Red染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
注意事项:
- 鉴于Gel Red的高灵敏性,建议减少DNA的上样量,推荐已知浓度样品的上样量为50-200ng/泳道(8泳道的小胶孔),对于未知浓度的样品,尝试上样2-3μL。
- 使用胶染法时,经检测Gel Red跟市面上的一些DNA Ladder存在不匹配的现象,若出现此种情况,请使用泡染法。
- 推荐用1×TBE缓冲液代替 TAE,因为含硼酸盐的试剂导电性更好。电泳时电压不宜过高,一般TBE不要超过120V,TAE不要超过100 V。
- 染料无需低温冷藏,请于室温下储存,以避免沉淀,若发现沉淀,请将染料加热至45-50℃,2 min,振荡溶解,不影响使用效果。
- 产品信息仅供参考。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
*推荐:丙烯酰胺凝胶核酸电泳推荐使用我司Page Gel Red染料,效果更佳。
常见问题:
问题 | 建议 |
胶染法中DNA条带弥散,拖尾怎么解决? |
|
Gel Red是否可用于单链DNA或 RNA染色? | Gel Red可以用来染色单链DNA和RNA,但是它对双链DNA的灵敏度是单链DNA或RNA的两倍。 |
Gel Red与哪些loading buffer兼容? | 通常使用含有15%甘油、7.5% Ficoll 400、0.05%溴酚蓝和0.1%专利蓝VF的6×loading buffer。需要注意的是,loading buffer 中的SDS可能会造成Gel Red前染中条带的弥散和拖尾,如果出现这种情况,我们建议使用后染法。 |