产品详情
Western Blot 膜再生液说明书
货号：P01500
规格：100mL/500mL
保存：2-8℃，一年有效。
产品简介：
使用膜再生液可以对同一张膜进行多次Western Blot 检测。在室温条件下，将用过的膜浸泡在膜再生液10-60分钟，可在不影响抗原蛋白的情况下清除膜上结合的抗体。随后，可以使用不同的抗体进行下一轮Western Blot实验。适宜从少量样品多次检测不同蛋白质。即使样品量并不匮乏，采用这一策略多次检测同一张膜上的蛋白，能省去给药处理、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。
Western Blot 膜再生液特点是：室温下使用；可对同一张膜进行5 次以上的Western Blot 检测。
适用：清除硝酸纤维素膜或PVDF 膜上结合的抗体，不影响抗原蛋白。
使用方法：
1、将缓冲液加入具有密闭盖的小塑料盒中，将膜充分浸泡于适当体积的再生液中（能覆盖膜），室温洗脱 10-20 分钟，时间长短应该参考注意事项进行优化，洗脱某些抗体需较长时间，更有长达 60 分钟之久，如果室温洗脱效果不好，可将膜再生液加热至50 度，在 50 度水浴条件下进行洗脱。
2、取出膜，用洗涤液（如TBST 等）漂洗两次，每次5min。
3、此时膜上抗体已除去，可重新封闭后再加入另一种抗体进行检测。
注意事项：
- 膜再生液实质是在不影响膜上结合的抗原的条件下将抗体洗脱下来，实际操作中，膜类型、抗体类型、浓度及抗原特性都影响洗脱难易度。
- 适用于ECL 和类似的化学发光试剂进行的Western 检测。不适用于非化学发光试剂进行的Western检测，例如DAB，NBT/BCIP。
- 用ECL 显色后，再生液洗脱几分钟后，可再次加入ECL 显色液显影，如胶片上显示条带，表明抗体未除净，须进一步在再生液中浸泡，至胶片上无显色。
- 使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用BSA 封闭的膜更容易再生。
- 尽量避免让膜干燥。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。