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草酸铵结晶紫染色液(0.4%)说明书
货号:R00200
规格:l00mL
保存:2-8℃, 避光保存,有效期1年。
草酸铵结晶紫染色液是革兰氏染色法中的一种成分,主要由草酸铵、结晶紫、乙醇等组成。革兰阳性菌染色中,细胞经草酸铵结晶紫染色后再经Gram碘液处理,形成不溶性复合物,该复合物不能通过细胞壁, 不易被脱色,所以保持紫色。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。
接种环或挑取细菌的其他工具、酒精灯、载玻片、光学显微镜
涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与水混合均匀,涂成薄层。
干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3-5次,每次1s,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。
初染:滴加结晶紫染色液染色l-2min,清水冲洗去染色液。
媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片室温放置l-2min, 水洗。
脱色:滴加脱色液摇动,摇动10-30s, 直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。
染色结果: | ||
革兰氏阳性菌 | 蓝色至紫色 | |
革兰氏阴性菌 | 红色 | |
1、涂片之前,应事先在背面做好圆圈标记,以便判断后续试验的位置。
2、取细菌时,应注意自我防护,拔或塞试管塞时,应将试管口通过火焰略加烧灼,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
3、加热固定涂片时,应注意玻片勿太靠近火焰,一般要求玻片温度不超过60℃, 以玻片背面触及手背皮 肤不觉过烫为宜。
4、革兰氏染色的关键在于严格掌握脱色程度,脱色时间应根据经验判断。脱色过度,阳性菌可被误染为 阴性菌;脱色不够,阴性菌可被误染为阳性菌。