Ehrlich苏木素染色液
货号:R00360
规格:100ml/500ml
保存:RT 避光,12个月。
产品说明:
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素成熟的方法有自然氧化法、化学氧化法。自然氧化是指暴露于光和空气中,这个过程比较缓慢,约需3~6个月不等,但生成物染色能力可维持很长时间。Ehrlich和Delafield苏木素就属于这种。Ehrlich苏木素作为一种良好的核染色液,也可用于黏蛋白染色如软骨的黏液多糖,骨和软骨的染色也推荐使用Ehrlich苏木素染液。
Ehrlich苏木素染液对核染色质染得很清晰细致,染色时间也稍长,约15~20min。适用于教学和科研上的制片染色,用此染色液对冷冻切片染色则不理想。
自备材料:
1、盐酸乙醇分化液
2、蓝化液,如稀氨水、碳酸锂溶液等
3、系列乙醇
4、伊红染色液
5、4%多聚甲醛
操作步骤(仅供参考):
(一) 石蜡切片染色
1、切片脱蜡至水
①二甲苯作用2次,每次5~10min。
②(可选)无水乙醇作用2次,每次3~5 min。
③95%的乙醇3~5 min。
④90%的乙醇3~5 min。
⑤80%的乙醇3~5 min。
⑥自来水或蒸馏水冲洗1~3min。
2、染色
①Ehrlich苏木素染色液染色15~20 min。
②自来水或蒸馏水冲洗5~10s。
③(可选)盐酸乙醇分化2~5s。
④自来水冲洗20~30 s。
⑤(可选)蓝化液返蓝20~40 s。
⑥自来水冲洗30~60 s。
⑦伊红染色液染色10~20s。
⑧自来水冲洗1~5 s。
3、脱水、透明、封固
①80%乙醇10~20 s。
②90%乙醇10~20 s。
③95%乙醇作用2次,每次1~2min。
④无水乙醇作用2次,每次2~3 min。
⑤二甲苯透明3次,每次2~3 min。
⑥中性树脂封片。
染色结果:细胞核呈蓝色;细胞质、肌纤维、胶原纤维等呈深浅不一的红色;角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。
(二) 细胞染色
1、4%多聚甲醛固定10~20min。
2、自来水冲洗2次,每次2min。
3、蒸馏水冲洗2次,每次2min。
4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,作用时间应相应缩短。
染色结果:细胞核呈蓝色;细胞质、纤维呈红色。
注意事项:
1. 切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。
2. 盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。
3. 蓝化液常使用0.2~1%氨水或Scott促蓝液或0.1~1%碳酸锂溶液。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。