Masson三色染色液(固绿法)说明书
货号:R01340
规格:7×50ml/7×100ml
保存:RT 避光,12个月。
产品内容:
名称 | 7×50ml | 7×100ml | Storage | |
试剂(A) :Weigert 铁苏木素染色液 | A1:Weigert染液A | 25ml | 50ml | RT 避光 |
A2: Weigert染液B | 25ml | 50ml | RT | |
临用前,取A1、A2等量混合即为Weigert铁苏木素染色液,不宜提前配制。 | ||||
试剂(B): 酸性分化液 | 50ml | 100ml | RT | |
试剂(C): Masson蓝化液 | 50ml | 100ml | RT | |
试剂(D): 丽春红品红染色液 | 50ml | 100ml | RT 避光 | |
试剂(E): 弱酸溶液 | 50ml | 100ml | RT | |
试剂(F): 磷钼酸溶液 | 50ml | 100ml | RT 避光 | |
试剂(G): 固绿染色液 | 50ml | 100ml | RT 避光 | |
产品说明:
结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维,而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量都很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(苯胺蓝),主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
三色染色的特点:①染色稳定;②分化时间短,1~2s;③色彩清晰鲜艳;④适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
自备材料:
- 固定液:选用甲醛升汞或甲醛盐溶液
- 系列乙醇
- 蒸馏水
操作步骤(仅供参考):
- 切片常规脱蜡至水,用配制好的Weigert铁苏木素染色5~10min。
- 用酸性分化液分化,水洗。
- 用Masson蓝化液返蓝,水洗。
- 蒸馏水洗1min。
- 丽春红品红染色液染色5~10min。
- 在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1比例配制弱酸工作液,用弱酸工作液洗1min。
- 磷钼酸溶液洗1~2min。
- 用配制好的弱酸工作液洗1min。
- 直接入固绿染色液中染色1~2min。
- 用配制好的弱酸工作液洗1min。
- 11、95%乙醇快速脱水。无水乙醇脱水3次,每次5~10s。
- 二甲苯透明3次,每次1~2min。中性树胶封固。
染色结果:
细胞核,胶原纤维/蛋白 | 绿色 |
胞浆、肌肉、红细胞 | 红色 |
注意事项:
- 切片脱蜡应尽量干净。固定起着重要的作用,使用不同的固定液可延或缩短染色时间。
- 取A1、A2等量混合即为 Weigert铁苏木素染液,一般24h失去染色力。
- 酸性分化液分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
- 弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳,如使用量大可自行配制0.1~0.3%乙酸溶液予以替代。
- 磷钼酸分化时要在镜下控制,分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定,一般1~2min。
- Masson蓝化液亦可自行配制Scott促蓝液或0.1~1%碳酸锂水溶液予以替代。