改良番红O-固绿软骨染色试剂盒

改良番红O-固绿软骨染色液

货号：R02420

规格：5×50mL/5×100mL

保存：室温，避光保存，有效期1年。

试剂盒内容：

产品简介:

软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。

改良番红0-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织和骨组织区分开。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映了基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析。固绿与胶原纤维结合，不宜褪色。番红O-固绿染色的分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。

自备材料：

10%福尔马林固定液，脱钙液，蒸馏水，系列乙醇。

操作步骤（仅供参考）：

1、标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。

2、常规脱蜡至水。

3、入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min，水洗。

4、酸性分化液分化15s。

5、蒸馏水洗10min。

6、在固绿染色液内浸染5min。

7、快速用弱酸溶液洗涤切片10-15s，以便去除残留的固绿。

8、入Safranin O stain内浸染5min。

9、分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。

10、二甲苯透明，光学树脂封固。

染色结果：

注意事项：

1、需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。

2、Weigert苏木素染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h失去染色能力。

3、切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。

4、切片分化时间应恰当，以背景呈绿色为宜。

5、Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。

6、95%乙醇脱水时间不宜过长。

7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。