天狼星红染色液(试剂盒) 说明书
注意：本试剂盒操作有所变动，使用前请先仔细阅读本说明书。
货号：R02435
规格：2×50ml /2×100ml
保存：RT 避光，有效期2年。
产品内容：
规格 名称 | 2×50ml | 2×100ml | Storage | |
试剂(A)：Weigert铁苏木素溶液 | A1：Weigert 染液 A | 25ml | 50ml | RT 避光 |
A2：Weigert 染液 B | 25ml | 50ml | RT 避光 | |
临用时，取A1、A2按1:1等量混合均匀后使用，现配现用。 | ||||
试剂(B)：天狼星红染色液 | 50ml | 100ml | RT 避光 | |
试剂(C)：酸化水浓缩液 | 1ml | 1ml×2 | RT | |
临用前按酸化水浓缩液：蒸馏水=1:100的比例稀释成酸化水工作液即可。 | ||||
产品说明：
胶原纤维（ Collagen Fiber）是结缔组织中分布最广含量最多的一种纤维，广泛分布于各种脏器，其中皮肤、巩膜、肌腱最丰富。Ⅰ型胶原纤维主要是骨、皮肤、肌腱纤维；Ⅱ型胶原纤维主要是软骨胶原；Ⅲ型胶原纤维主要在胚胎组织、成人血管、胃肠道；Ⅳ胶原纤维主要在基膜中。天狼星红与其衬染液都是强酸性染料，易与胶原分子中的碱性基团结合，吸附牢固。偏振光镜检测，胶原纤维有正的单轴双折光性的属性，与天狼星红复合染色液结合后，可增强双折射，提高分辨率，从而区分两型胶原纤维。
金克隆天狼星红染色液主要由Weigert 铁苏木素染色液、天狼星红染色液组成，主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中，在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色，肌纤维被染成黄色，在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维，但所用抗体昂贵，操作费时，而采用天狼星红染色试剂便宜，操作简单。
自备材料：
- 10%的福尔马林固定液
- 普通光学显微镜或偏振光显微镜
操作步骤（仅供参考）：
1. 组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。
2. 切片厚度 6µm，常规脱蜡至水。
3. Weigert铁苏木素染色液染色10-20min。
4. 自来水洗5-10min，蒸馏水洗一次。
5. 天狼星红染色液染 1h （片子较少时建议滴染）
6. 不经水洗，快速用酸化水工作液洗30s。
7. 蒸馏水洗30s。
8. 用95%和100%乙醇脱水，透明，中性树胶封固。
染色结果：
普通光学显微镜：
胶原纤维 红色
细胞核 蓝色或蓝褐色
肌纤维 黄色
偏振光显微镜：
Ⅰ 型胶原纤维 强橙黄色或亮红色
Ⅲ 型胶原纤维 绿色
注意事项：
1. 为使在偏振光镜下显示清晰，本法的切片厚度以6～7µm为宜。
2. 用Weigert铁苏木素染液染细胞核，可不受天狼星红染液的影响。
3. 本法染色稳定，不易褪色。
4、石蜡切片烤片不影响染色
5、有文献表明冰冻切片染色会比石蜡切片偏红一些
6、一般50ml溶液大约可染50-100张片子
7、不染苏木素的时背景可能会有杂染属于正常现象
8、染色不均匀，可能是染色过程中出现干片的原因，应防止染料沉积
9、染色注意避光，试剂中PA成分对光敏感
10、本操作有所改动，客户可根据自己具体实验要求进行。
12、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。