天狼星红染色液说明书
货号：R02445
规格：100mL/500mL
保存：RT 避光，有效期1年。
产品说明：
胶原纤维(Collagen Fiber)是结缔组织中分布最广含量最多的一种纤维，广泛分布于各种脏器， 其中皮肤、巩膜、肌腱最丰富。天狼星红与其衬染液都是强酸性染料，易与胶原分子中的碱性基团 结合，吸附牢固。偏振光镜检测，胶原纤维有正的单轴双折光性的属性，与天狼星红复合染色液结合后，可增强双折射，提高分辨率，从而区分两型胶原纤维。
自备材料：
10%的福尔马林固定液；普通光学显微镜或偏振光显微镜；Weigert铁苏木素染色液；0.5%醋酸水溶液
操作说明：（仅供参考，请注意本操作有所改动，客户可根据自己具体实验要求进行。）
石蜡切片：
1. 组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。
2. 切片厚度 6µm，常规脱蜡至水。
3. Weigert铁苏木素染色液染色10-20min。
4. 自来水洗5-10min，蒸馏水洗一次。
不进行核染色时，苏木素染色步骤可省略。
5. 天狼星红染色液染1h （片子较少时建议滴染，染色时间可依据具体实验效果优化10min-30min或更短时间）
6. 不经水洗，快速用0.5%醋酸水溶液快速洗30秒(红色背景较深时用)。
7. 蒸馏水洗30s。
8. 用95%和100%乙醇脱水，透明，中性树胶封固。
冰冻切片（一般不建议使用）：
- 取材后需立即置于超低温冰箱或液氮中保存
- 样本冰冻切片后，立即入10%福尔马林（或4%多聚甲醛）中固定冷冻切片30分钟
- 蒸馏水冲洗2min×3
- 染色步骤与石蜡切片相同
- 使用酸化水分化
染色结果：
普通光学显微镜： 胶原纤维 红色
细胞核 蓝色或蓝褐色
肌纤维 黄色
偏振光显微镜： Ⅰ型胶原纤维 强橙黄色或亮红色
Ⅲ 型胶原纤维 绿色
注意事项：
1、为使在偏振光镜下显示清晰，本法的切片厚度以6～7μm为宜。
2、本法染色稳定，不易褪色
3、石蜡切片烤片不影响染色
4、有文献表明冰冻切片染色会比石蜡切片偏红一些
5、一般50ml溶液大约可染50-100张片子
6、不染苏木素的时背景可能会有杂染属于正常现象
7、染色不均匀，可能是染色过程中出现干片的原因，应防止染料沉积
8、染色注意避光，试剂中PA成分对光敏感
9、使用前将染液放置室温平衡，摇晃溶液后使用，确保溶剂达到室温溶解状态。
10、用Weigert铁苏木素染液染细胞核，可不受天狼星红染液的影响。
12、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
13、本品为饱和溶液，收到产品请放置RT，防止饱和成分析出影响使用。